膀胱移性細(xì)胞癌p16基因缺失、突變、甲基化及其蛋白表達(dá)的研究.pdf

1、目的對(duì)25例膀胱移性細(xì)胞癌(bladder transitional cell carcinoma簡(jiǎn)稱(chēng)膀胱癌bladder cancer)患者的p16基因第一、第二外顯子純合性缺失,第二外顯子的點(diǎn)突變,第一外顯子區(qū)5′CpG島的甲基化情況及p16蛋白表達(dá)進(jìn)行檢測(cè),探討p16基因在膀胱癌中失活的方式及p16蛋白表達(dá)與膀胱癌之間的關(guān)系.方法取患者膀胱癌組織,用酚/氯仿法提取癌組織基因組DNA,設(shè)計(jì)p16基因第一、二外顯子引物,采用聚合酶鏈反

2、應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)、PCR-單鏈構(gòu)象多態(tài)性(PCR-single strand conformational polymorphism,PCR-SSCP)、甲基化敏感限制性內(nèi)切酶-PCR分析方法,對(duì)25例膀胱癌患者的癌組織基因組DNA的p16基因第一、二外顯子的純合性缺失、第二外顯子點(diǎn)突變及第一外顯子區(qū)5′CpG島的甲基化情況進(jìn)行分析.應(yīng)用S-P免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)25例膀胱癌和6例正常膀胱

3、粘膜組織中p16基因的表達(dá)情況,并分析其意義.結(jié)論p16基因的失活方式主要有三種:純合性缺失、點(diǎn)突變和5′CpG島的甲基化,但外顯子2的純合性缺失在安徽區(qū)域發(fā)生的膀胱癌中可能不是一個(gè)較頻繁發(fā)生的"事件";通過(guò)p16基因第一外顯子區(qū)5′CpG島異常甲基化失活可能是膀胱癌p16基因失活的主要機(jī)制.在這25例膀胱癌患者中,未發(fā)現(xiàn)p16基因的點(diǎn)突變,但仍不能排除這種失活機(jī)制,我們將通過(guò)擴(kuò)大樣本,進(jìn)一步研究p16基因的點(diǎn)突變情況.p16基因表達(dá)產(chǎn)