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1、目的:腫瘤抑制基因p16基因位于染色體9p21上,全長8.5kb,由兩個內(nèi)含子和三個外顯子組成,因該蛋白分子量為15.8kD,故稱為p16。p16蛋白為細胞周期調(diào)節(jié)蛋白,它可以和細胞周期素D競爭性地與Cdk4結(jié)合。p16基因的失活可以使p16蛋白表達受到抑制,進而使細胞周期素D與Cdk4優(yōu)勢結(jié)合,使細胞生長失去控制,細胞表型發(fā)生變化,最終導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。對胃癌細胞株、胃癌及癌旁組織和癌前病變進行研究,通過對p16基因啟動子CpG島的甲基
2、化狀態(tài)和對胃癌細胞株轉(zhuǎn)錄表達的檢測,探討了甲基化與胃癌及癌前病變之間以及和其mRNA表達的關(guān)系。 方法:標(biāo)本為蘭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院消化內(nèi)鏡中心所取的內(nèi)鏡下胃癌標(biāo)本和本院外科的胃癌手術(shù)切除標(biāo)本,其中胃癌標(biāo)本31例,癌旁標(biāo)本23個.胃癌細胞株為SGC-7901和BGC-823,另有癌前病變53例和正常胃粘膜組織10例。采用甲基化特異性PC剛?cè)?MSP)檢測p16基因甲基化狀態(tài),RT-PCR方法檢測p16基因rnRNA的表達。
3、 結(jié)果:采用MSP法對兩種細胞株BGC-823和SGC-7901的p16基因啟動子區(qū)域CpG島甲基化狀態(tài)進行的檢測其結(jié)果都為陽性,而RT-PCR的檢測結(jié)果都為陰性.胃癌組織的甲基化率為74.1﹪(23/31);癌旁組織的甲基化率為73.9﹪(17/23);癌前病變的甲基化率為58.4﹪(31/53);10例正常胃粘膜未能檢測到p16的甲基化狀態(tài);胃癌組織中低分化癌和中/高分化癌甲基化率分別為85.7﹪(12/14)和64.7﹪(11/1
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