胃腸道間質(zhì)瘤中E-cadherin、p16基因超甲基化和蛋白表達(dá)的研究.pdf

1、本文研究背景和目的：胃腸道間質(zhì)瘤(Gastrointestinal stromal tumors，GISTs)是胃腸道最常見的間葉源性腫瘤，具有不確定的惡性潛能，容易復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移。目前研究認(rèn)為啟動子區(qū)超甲基化可能是腫瘤抑癌基因沉默的常見機(jī)制，并且能夠作為腫瘤診斷及預(yù)后的標(biāo)記。本研究通過檢測CD117陽性GISTs中E-cadherin(CDH1)、p16基因啟動子區(qū)CpG島超甲基化狀況和蛋白表達(dá)情況分析它們的作用、意義。 研究方法：

2、收集2003～2006年56例GISTs手術(shù)切除標(biāo)本，其中20例同時(shí)留取新鮮組織，經(jīng)常規(guī)HE，CD117、CD34、SMA、S-100免疫組化染色確定診斷：采用甲基化特異性PCR(MSP)檢測GISTs石蠟包埋組織中E-cadherin和p16基因啟動子區(qū)超甲基化狀態(tài)；免疫組織化學(xué)方法檢測E-cadherin(E-cd)、p16蛋白的表達(dá)；并且應(yīng)用Western-blot方法檢測20例新鮮GISTs組織中E-cd和Dysadherin蛋

3、白表達(dá)情況。應(yīng)用SPSS 11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 研究結(jié)果： 1.56例胃腸道間質(zhì)瘤中E-cadherin基因超甲基化率為32％(18/56)，在極低、低、中、高度侵襲危險(xiǎn)組中分別為9％(1/11)、2l％(4/19)、41.6％(5/12)、57％(8/14)；p16基因啟動子區(qū)超甲基化率34％(19/56)，在極低、低、中、高侵襲危險(xiǎn)組中分別為0％(0/11)、16％(3/19)、50％(6/12)、71％(1

4、0/14)。統(tǒng)計(jì)分析表明，56例病例中E-cadherin和/或p16基因啟動子區(qū)超甲基化狀態(tài)(23/56，41％)與GISTs侵襲危險(xiǎn)性分級及部位的差異具有顯著性(P<0.05)。 2.E-cadherin和/或p16基因超甲基化狀態(tài)與患者年齡、性別以及組織學(xué)類型的差異無顯著性(P>0.05)。 3.p16基因啟動子區(qū)超甲基化率34％(19/56)，免疫組化分析結(jié)果顯示，p16蛋白陽性細(xì)胞數(shù)小于50％病例占44.6％，

5、蛋白表達(dá)強(qiáng)度與GISTs侵襲危險(xiǎn)性分級之間的差異具有顯著性(P<0.05)，p16基因CpG島超甲基化與蛋白表達(dá)相關(guān)，是GISTs發(fā)展的重要事件。 4.p16表達(dá)強(qiáng)度與GISTs組織學(xué)類型、部位、年齡、性別的差異無顯著性(P>0.05)。 5.Dysadherin在不同侵襲危險(xiǎn)度級別GISTs中均有較高水平的表達(dá)，其表達(dá)量與GISTs危險(xiǎn)度相關(guān)(P<0.05)。GISTs中僅有E-cd的微弱表達(dá)。 研究結(jié)論：

6、 1.E-cadherin和/或p16基因啟動子區(qū)超甲基化狀態(tài)與胃腸道間質(zhì)瘤侵襲危險(xiǎn)度分級顯著相關(guān)，聯(lián)合檢測可能成為GISTs危險(xiǎn)度評估的分子標(biāo)記物，并將對該病的治療提供新的思路。 2.p16蛋白表達(dá)下調(diào)與GISTs危險(xiǎn)程度有關(guān)(P<0.05)，表達(dá)量小于50％可作為揭示該腫瘤預(yù)后不良的指標(biāo)。p16啟動子區(qū)超甲基化是蛋白表達(dá)下調(diào)的原因之一，免疫組化方法檢測其表達(dá)將成為揭示GISTs預(yù)后的可行方法。 3．GISTs中E