骨髓CD34+細胞種植人工血管對預(yù)防血管置換并發(fā)癥的研究.pdf

1、目的：探討骨髓 CD34+細胞分別種植于常用膨體聚四氟乙烯(expanded polytera fluoroethylene ePTFE) 人工血管和滌綸人工血管的內(nèi)皮化程度和中遠期通暢率。 方法：抽取犬骨髓，梯度離心提取單個核細胞，再經(jīng)免疫磁珠系統(tǒng)分離并提純出 CD34+細胞，分別種植于 ePTFE和滌綸人工血管，把犬分為 ePTFE 血管實驗組和滌綸血管實驗組及 ePTFE 對照組和滌綸對照組，在各組中分別把該同一種人工血管

2、同時植入同一條犬的下腔靜脈和腹主動脈，在術(shù)后 10、30、60、100 天后獲取標本，比較種植組和對照組移植后的通暢率；標本切片，免疫組化法鑒定內(nèi)皮細胞；通過大體觀察和光鏡及掃描電鏡觀察不同時間內(nèi)膜增生及內(nèi)膜內(nèi)皮化的情況，觀察新生內(nèi)膜厚度；比較動脈和靜脈系統(tǒng)骨髓CD34+細胞種植人工血管后內(nèi)皮化情況及通暢率。 結(jié)果：(1)犬骨髓免疫磁珠系統(tǒng)分離的細胞經(jīng)流式細胞儀鑒定為CD34+細胞。由免疫磁珠系統(tǒng)分離并純化的 CD34+細胞經(jīng)臺

3、盼蘭染色后細胞計數(shù)板計數(shù)活細胞為2.6(±0.3)×10<'7>/ml。 (2)經(jīng)免疫組化鑒 CD34+細胞種植后的人工血管內(nèi)壁細胞層為內(nèi)皮細胞。 (3)內(nèi)皮化人工血管植入動脈閉塞率 0，ePTFE 組狹窄率 25﹪；滌綸組狹窄率 25﹪。人工血管植入靜脈 ePTFE 組閉塞率 12.5﹪，狹窄率37.5﹪；滌綸組閉塞率 0，狹窄率 37.5﹪。對照組植入動脈閉塞率 0，狹窄率 100﹪；對照組植入靜脈閉塞率 100﹪。

4、 (4)光鏡下觀察 HE 染色試驗組滌綸血管新生內(nèi)膜貼附腔面緊密且完整， ePTFE血管新生內(nèi)膜在HE染色后與血管腔面有部分分離。實驗組兩種人工血管新內(nèi)膜厚度小于對照組新內(nèi)膜厚度，實驗組兩種血管新內(nèi)膜厚度存在差異。 (5)掃描電鏡觀察：實驗組30天人工血管自吻合口向人工血管中間方向的腔面新生內(nèi)膜內(nèi)皮細胞密度逐漸減少；100天人工血管腔面內(nèi)膜內(nèi)皮細胞排列均勻完整。滌綸人工血管的新內(nèi)膜覆以較完整內(nèi)皮細胞層，細胞排列緊密，走行與血管長

5、軸一致。ePTFE血管新內(nèi)膜較同期滌綸血管新生內(nèi)膜欠完整，少量區(qū)域內(nèi)皮層缺乏，表面附著纖維素和血細胞，其間見壞死和衰老的內(nèi)皮細胞。對照組人工血管內(nèi)膜表面無內(nèi)皮細胞覆蓋，僅見纖維組織排列。 結(jié)論： (1)經(jīng)免疫磁珠系統(tǒng)分離的CD34+細胞經(jīng)純化后細胞數(shù)量多，增殖能力強，細胞的數(shù)量能滿足20-30cm長，直徑6-8 mm人工血管腔面的內(nèi)皮化種植。 (2)經(jīng)免疫組化鑒定種植后的人工血管內(nèi)壁細胞為內(nèi)皮細胞。 (3)經(jīng)純化