鈣調(diào)磷酸酶調(diào)節(jié)蛋白1(RCAN1)與NF-κB相互作用機(jī)制及其影響白血病細(xì)胞活力的研究.pdf

1、核轉(zhuǎn)錄因子-κB屬于核轉(zhuǎn)錄因子家族，這些轉(zhuǎn)錄因子和逆轉(zhuǎn)錄癌基因蛋白vRel具有同源性。在急性淋巴細(xì)胞性白血病(ALL)，急性髓系白血病(AML)，霍奇金氏淋巴瘤等這些血癌以及其他多種實(shí)體瘤中，NF-κB的活性處于一個(gè)非正常的高水平(1-4)。被激活的NF-κB具有抗凋亡的作用，并且被認(rèn)為是多種腫瘤的一種關(guān)鍵存活因子(5，6)。在TEL-JAK2轉(zhuǎn)基因鼠的人類T-ALL模型中(7)，NF-κB的缺失緩解了白血病的發(fā)生。在白血病模型鼠以及人

2、類ALL細(xì)胞中，抑制了NFκB的信號(hào)通路將有效的抑制了腫瘤的生成(8)。對(duì)NF-1B信號(hào)通路的抑制作用被認(rèn)為是那些皮脂性，非皮脂性抗炎癥藥物和天然及合成的化合物用于治療和防治腫瘤的重要機(jī)制。
　　 哺乳動(dòng)物中NF-κB的家族由五個(gè)成員組成，分別為NF-κBl(p50)，NF-κB2(p52)，RelA(p65)，RelB和C-Rel，這些家族成員分別組成了多種同源或異源的二聚體(9)。NF-κB的抑制子IκBs對(duì)NF-1B的活性

3、有緊密調(diào)節(jié)作用(10)。IκBs結(jié)合到NFκB的二聚體上，從空間上遮掩了它們的核定為序列，導(dǎo)致NF-κB滯留在胞漿內(nèi)。當(dāng)細(xì)胞被腫瘤壞死因子TNFα(tumor necrosis factorα，TNFα)和脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)等刺激物激活時(shí)(11，12)，IκBα的第32和36位絲氨酸殘基保守位點(diǎn)被磷酸化，磷酸化后的IκBα將被泛素化，隨之被蛋白酶體降解(13)。IκBα被蛋白酶體降解后，NF-κB二聚

4、體將被釋放，并轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核內(nèi)，接著進(jìn)行目的基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控(9)。另一種NF-κB激活機(jī)制為IκBα第42位絡(luò)氨酸的磷酸化(14，15)，有的研究表明第42位絡(luò)氨酸磷酸化后IκBα?xí)唤到?，有的則顯示IκBα不會(huì)被降解(15-17)。
　　 在唐氏綜合癥關(guān)鍵區(qū)域(Down Syndrome Critical Region， DSCR)(18，19)中首次被發(fā)現(xiàn)的基因，鈣調(diào)磷酸酶調(diào)節(jié)蛋白R(shí)CAN1(regulator of calc

5、ineurin1， RCAN1)，能與神經(jīng)鈣調(diào)節(jié)蛋白calcineurin亞基A相互作用，由此抑制了calcineurin在體內(nèi)和體外的活性(20-24)。有趣的是，RCAN1不僅能通過抑制calcineurin的活性來抑制NFAT的信號(hào)通路(25)，而且能被calcineurin-NFAT信號(hào)通路激活，例如鈣離子，VEGF，血管緊張素Ⅱ，TNF-α等（26，27），由此RCAN1的基因調(diào)控形成了負(fù)反饋調(diào)節(jié)。這種緊而有序的RCAN1負(fù)反

6、饋調(diào)節(jié)預(yù)示著RCAN1在細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)有重要作用。最近的一些研究表明，RCAN1與癌癥相關(guān)聯(lián)。在單拷貝RCAN1轉(zhuǎn)基因小鼠中，RCAN1能有效地抑制腫瘤生長，這種抑制作用是由于calcineurn信號(hào)通路被抑制，以至于在腫瘤生長中血管生成被抑制(28，29)。因此，可以合理的推測cyclosporinA和FK506，以及能特異性抑制calcineurin的免疫反應(yīng)抑制藥，將會(huì)抑制腫瘤血管的生成。然而，奇怪的是，許多臨床研究顯示，一些患者

7、在進(jìn)行一系列復(fù)雜的移植并接受長期的免疫抑制治療后，他們患癌癥的概率明顯增高(30)。到目前為止，這種具體機(jī)制尚未清楚，然而，這些研究預(yù)示著RCAN1除了抑制calcineurin信號(hào)參與了腫瘤發(fā)生外，將還會(huì)有一種新的機(jī)制參與腫瘤發(fā)生。由于在癌癥中NF-κB有重要作用，因此我們將研究RCAN1和NF-κB在腫瘤的發(fā)生中是否有相關(guān)作用。
　　 在我們的研究中，我們發(fā)現(xiàn)RCAN1能抑制NF-κB的活性。具體機(jī)制為RCAN1能與IκBα