人源性VEGF受體融合蛋白抑制激光誘導(dǎo)恒河猴脈絡(luò)膜新生血管的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：脈絡(luò)膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)是許多眼底疾病的共同病理過(guò)程，是一種退行性改變，可發(fā)生于多種眼部疾病如年齡相關(guān)性黃斑變性(iage-related macular degeneration,AMD)、病理性近視等，最終導(dǎo)致嚴(yán)重且不可逆的視力喪失。因此，構(gòu)建一種更接近于人類(lèi)的CNV動(dòng)物模型，并尋求有效治療CNV的方法具有重大意義。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)構(gòu)建實(shí)驗(yàn)性恒河猴脈絡(luò)膜新生血管動(dòng)物模型，觀察

2、人源性VEGF受體融合蛋白對(duì)脈絡(luò)膜新生血管的抑制作用。 方法： 1．第一部分恒河猴脈絡(luò)膜新生血管動(dòng)物模型的構(gòu)建 1.1 實(shí)驗(yàn)性恒河猴脈絡(luò)膜新生血管模型構(gòu)建：普通級(jí)健康成年恒河猴8只，全身麻醉后采用532nm激光圍繞黃斑中心凹光凝(雙眼，每只眼光凝8個(gè)激光點(diǎn)，光斑直徑50tma，功率0.4w，曝光時(shí)間0.1s)，建立CNV模型。 1.2 光凝后20d，采用眼底照相、FFA及OCT觀察脈絡(luò)膜新生血管生成的情況

3、。 2．第二部分人源性VEGF受體融合蛋白抑制恒河猴脈絡(luò)膜新生血管的體內(nèi)試驗(yàn) 2.1 光凝20d造模成功后，將8只恒河猴隨機(jī)分為4組：分別為空白對(duì)照組(生理鹽水)、低劑量組(100μg)、中劑量組(300μg)和高劑量組(500μg)，實(shí)驗(yàn)組恒河猴雙眼玻璃體腔內(nèi)注射不同劑量人源性VEGF受體融合蛋白。 2.2 各組動(dòng)物分別于給藥后2w、4w進(jìn)行眼底照相、FFA及OCT檢查，觀察的眼底有無(wú)出血、CNV病灶大小和熒光

4、素滲漏的變化情況。 2.3 根據(jù)FFA結(jié)果，運(yùn)用計(jì)算機(jī)軟件定量分析CNV大小及滲漏面積變化，做統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。 2.4 通過(guò)OCT檢查CNV的生成以及人源性VEGF受體融合蛋白對(duì)其抑制作用。 2.5 給藥后4w,各項(xiàng)檢查完畢后，根據(jù)要求處死各組動(dòng)物，摘除眼球，包埋、切片及常規(guī)HE染色，觀察各組動(dòng)物黃斑區(qū)視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)的變化。 結(jié)果： 1．光凝后20d，彩色眼底照相可見(jiàn)光凝區(qū)出現(xiàn)纖維組織增殖，F(xiàn)FA顯示光凝

5、斑處在造影早期即有熒光素顯影，隨即迅速滲漏，晚期形成強(qiáng)熒光區(qū)；OCT結(jié)果也顯示典型的CNV，表現(xiàn)為視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮下團(tuán)塊狀、梭形或不規(guī)則膨大，其間可見(jiàn)CNV膜的條帶狀或片狀紅白色高密度反光，可見(jiàn)上方的視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層淺脫離。 2．玻璃體腔注射人源性VEGF受體融合蛋白2w后，低劑量組中CNV引起的熒光素的滲漏無(wú)明顯改變(P>0.05)，中劑量組與高劑量組中CNV引起的熒光素滲漏減少(P<0.05)，但兩組對(duì)CNV引起的滲漏的抑制作