沙利度胺抑制細胞增殖和脈絡(luò)膜新生血管的實驗研究.pdf

1、天津醫(yī)科大學碩士學位論文沙利度胺抑制細胞增殖和脈絡(luò)膜新生血管的實驗研究姓名：馬敏旺申請學位級別：碩士專業(yè)：眼科學指導教師：陳松20060501天津醫(yī)科大學碩士學位論文沙利度胺抑制細胞增殖和脈絡(luò)膜新生血管的實驗研究中文摘要目的探討人臍靜脈內(nèi)皮細胞(IumanumbilicalvcinEndomel瑚cells，HUVEc)體外原代培養(yǎng)條件，探討沙利度胺(Ⅱlalidomide)對HUVEc的藥物作用，為研究沙利度胺對脈絡(luò)膜新生血管(cho

2、roidalneovascularization，cNV)的作用提供理論基礎(chǔ)。建立小鼠cNv模型，給小鼠腹腔注射沙利度胺，通過病理學檢查，評價藥物療效，同時評價沙利度胺的安全性和毒副作用。方法lHUvEc原代培養(yǎng)及沙利度胺抑制細胞增殖實驗研究11哪EC原代培養(yǎng)方法取足月新生兒臍帶，徹底清洗干凈，采用自治裝置，注入O1％的I型膠原酶5ml，消化10min，放入離心機中1000r／min，7分鐘，用20％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液，移入6孔板

3、培養(yǎng)。Ⅷ因子相關(guān)抗原檢測法鑒定所培養(yǎng)細胞。12沙利度胺對HUvEc的抑制作用沙利度胺溶于05％DMs0中，分為3組。A組為沙利度胺組，分4個濃度梯度，分別為10u咖l、25嶼／ml、50蟾，ml、75悖，m1；B組為沙利度胺地塞米松組，為含1晦，ml地塞米松的各濃度沙利度胺；C組為對照組；各組中DMsO濃度均為O5％。姍VEC傳代植入96孔板，細胞密度為l104／ml，過夜。然后加入不同濃度的藥物，處理72小時；加入MTT液體20m，c