沙利度胺逆轉(zhuǎn)癌性惡病質(zhì)的實驗研究.pdf

1、目的：本實驗通過構(gòu)建癌性惡病質(zhì)動物模型，采用沙利度胺預防用藥及正常用藥干預觀察對小鼠生活狀態(tài)（飲水、攝食、體重）、生化指標（總蛋白、甘油三酯、膽固醇）、細胞因子（TNF-α）和核轉(zhuǎn)錄因子（AP-1）、瘤體血管生成（MVD）的影響，對沙利度胺的抗惡病質(zhì)作用及其可能機制進行初步探討。
　　 方法：將鼠結(jié)腸腺癌26（colon26）細胞株皮下接種于BALB/c小鼠，構(gòu)建癌性惡病質(zhì)動物實驗模型。將82只雄性BALB/c小鼠隨機分成5組：

2、健康對照組（HC）：10只、癌性惡病質(zhì)組（CC）：18只、醋酸甲羥孕酮組（MPA）：18只、預防組（PLD）：18只、沙利度胺組（TLD）：18只。開始試驗前，所有小鼠在各分組籠中飼養(yǎng)1周，使其適應新的實驗環(huán)境。預防組自荷瘤小鼠皮下可觸及腫瘤結(jié)節(jié)開始，每天給予沙利度胺預防性治療。惡病質(zhì)組、甲羥孕酮組、沙利度胺組自荷瘤小鼠進入惡病質(zhì)開始，每天分別給予生理鹽水、甲羥孕酮、沙利度胺治療1周。期間監(jiān)測小鼠精神、活動狀態(tài)、毛色、體重、攝食量及飲水

3、量等的變化。之后每組處死10只，各組余下8只分別繼續(xù)原治療（劑量、用藥次數(shù)不變）至其自然死亡。應用全自動生化分析儀測定血漿各項生化代謝指標；采用放射免疫分析法測定血漿TNF-α的水平：采用免疫組織化學方法觀測腫瘤組織中AP-1的表達和MVD的計數(shù)。用SPSS13.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)處理，各組數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差（x±s）的形式表示。兩個獨立樣本組間均數(shù)比較用t檢驗，多組間均數(shù)差異性比較采用單因素方差分析（One-Way ANOVA）。<

4、br>　　 結(jié)果：
　　 1.動物模型
　　 小鼠接種colone26細胞3-5天后，均可以觸及到瘤結(jié)節(jié)，荷瘤小鼠精神、活動狀態(tài)、毛色等一般狀況無明顯變化。約兩個星期后荷瘤小鼠出現(xiàn)精神差、活動量減少、皮毛雜亂無光澤，攝食、飲水量相對減少，體重亦隨之下降，小鼠進入惡病質(zhì)狀念。隨著各組用藥干預后，荷瘤小鼠上述情況均有不同程度的好轉(zhuǎn)。
　　 2.瘤體重量及終末去瘤體重
　　 各組小鼠接種腫瘤細胞后，腫瘤體積逐

5、漸增加，隨之去瘤體重亦隨之下降。至第15天，所有荷瘤小鼠去瘤體重較健康組均明顯絳低（P<0.05），即所有荷瘤小鼠均進入惡病質(zhì)狀態(tài)。各治療組較惡病質(zhì)組瘤體重量減輕，但無統(tǒng)計學意義。預防組、甲羥孕酮組較惡病質(zhì)組終末終去瘤體重增加，并有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　 3.生化指標
　　 各組荷瘤小鼠進入惡病質(zhì)狀態(tài)后，血糖、甘油三酯水平較健康組均有不同程度的消耗，并且具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。各組荷瘤小鼠蛋白水平較惡

6、病質(zhì)組均有不同程度的提高，但無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。血糖水平，預防組較惡病質(zhì)組有明顯提高，并有統(tǒng)計學意義（P<0.05），但與甲羥孕酮相比無統(tǒng)計學意義。甘油三酯水平，預防組較惡病質(zhì)組、甲羥孕酮組有明顯提高，并有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　 4.血清細胞因子
　　 各組荷瘤小鼠血清細胞因子TNF-α顯著高于健康組，并具有統(tǒng)計性意義（P<0.05）。治療后各組小鼠血清細胞因子TNF-α較CC組顯著降低，同樣具有統(tǒng)

7、計學意義（P<0.05）。預防組、沙利度胺組小鼠治療后血清細胞因子TNF-α較甲羥孕酮組水平低，且預防組較沙利度胺組下降更明顯，但不具有統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　 5.腫瘤組織中AP-1、MVD的表達
　　 腫瘤組織中AP-1、MVD的表達趨勢相同，在健康組、預防組、沙利度胺組、甲羥孕酮組、惡病質(zhì)組中表達量依次升高，且其余各組較健康組有統(tǒng)計學意義（P<0.05），各藥物治療組較惡病質(zhì)組也有統(tǒng)計學意義（P<0.05

8、）。在MVD表達方面，甲羥孕酮組、沙利度胺組與惡病質(zhì)組相比無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　 6.生存時間
　　 惡病質(zhì)組小鼠平均生存時間較甲羥孕酮、預防組、沙利度胺組低，有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。但三個藥物治療組相比無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1.該實驗中進入惡病質(zhì)的荷瘤小鼠均出現(xiàn)不同程度的精神萎靡、厭食、消瘦、體重下降，并出現(xiàn)營養(yǎng)指標的改變，與人類癌性惡病質(zhì)相似，是研究人

9、類癌性惡質(zhì)發(fā)生機制及治療策略的理想平臺。
　　 2.惡病質(zhì)小鼠除了一般狀況下降、營養(yǎng)消耗外，血清細胞因子TNF-α活性亦明顯增高，提示惡病質(zhì)小鼠出現(xiàn)明顯的糖、蛋白、脂肪代謝紊亂、可能與促炎因子活性增高有關(guān)。
　　 3.沙利度胺能明顯改善惡病質(zhì)小鼠一般狀況，調(diào)節(jié)代謝紊亂，預防用藥更能增加終末去瘤體重，從而起到抗惡病質(zhì)的作用。在下調(diào)腫瘤組織中AP-1的表達活性和MVD計數(shù)、降低血清中TNF-α水平方面都顯示出一定的優(yōu)勢。尤其