室旁核注射APELIN-13對(duì)大鼠胃缺血-再灌注損傷的影響及其機(jī)制的研究.pdf

1、目的:我們以往的研究表明，下丘腦室旁核(paraventricular nucleus，PVN)是調(diào)控胃缺血-再灌注損傷(gastric ischemia-reperfusion injury,GI-RI)特異性中樞核團(tuán)之一。本工作的目的是研究PVN內(nèi)注射Apelin-13對(duì)大鼠GI-RI的影響及其機(jī)制。 方法:本實(shí)驗(yàn)采用健康Sprague-Dawley大鼠，PVN注射Apelin-13后，制備胃缺血-再灌注(GI-R)模型，運(yùn)

2、用免疫組化及免疫印跡等實(shí)驗(yàn)技術(shù)，觀察了PVN注射Apelin-13后，胃缺血30min，再?gòu)?fù)灌1h后胃粘膜的損傷指數(shù)和細(xì)胞增殖凋亡的變化、JNK通路的激活及凋亡相關(guān)基因bcl-2、bax的表達(dá)，從而揭示了PVN注射Apelin-13后，對(duì)大鼠GI-R的胃粘膜細(xì)胞增殖和凋亡的影響，JNK的激活規(guī)律，以及JNK的活化與胃粘膜細(xì)胞凋亡和增殖修復(fù)的關(guān)系。同時(shí)觀察了切除腹腔交感神經(jīng)節(jié)或切斷膈下迷走神經(jīng)對(duì)相關(guān)指標(biāo)的影響。 結(jié)果: (1)PV

3、N注射Apelin-13(0.2μg)能明顯加重GI-R胃粘膜損傷(P<0.05)；而PVN注射Apelin-13(0.04μg)對(duì)GI-RI沒(méi)有影響，另外應(yīng)用Apelin-13(1μg)與Apelin-13(0.2μg)相比差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，只有Apelin-13劑量達(dá)到5μg時(shí)與0.2μg劑量組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Apelin.13+GI-R組與GI-R組相比，PVN注射Apelin-13能明顯加重GI-R后1h胃粘膜的損傷，使

4、糜爛壞死增加。(2)Apelin-13+GI-R組與GI-R組相比，胃粘膜細(xì)胞凋亡增加，細(xì)胞的增殖減少。(3)PVN注射Apelin-13能明顯增加GI-R胃粘膜細(xì)胞內(nèi)JNK的磷酸化水平。(4)Apelin-13+GI-R組與GI-R組相比，PVN注射Apelin-13能明顯降低缺血-再灌注1h抗凋亡因子bcl-2水平(P<0.05)。同時(shí)PVN注射Apelin-13可以明顯增加缺血-再灌注1h的促凋亡因子bax的水平(P<0.05)。

5、(5)切除腹腔交感神經(jīng)節(jié)能明顯降低Apelin-13+GI-R組的損傷指數(shù)， JNK的磷酸化水平、caspase-3、bax的表達(dá)明顯減少。PCNA和bcl-2的表達(dá)增加，與假手術(shù)組相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(6)切斷膈下迷走神經(jīng)也能明顯降低Apelin-13+GI-R組的損傷指數(shù)，caspase-3、baX的表達(dá)明顯減少，PCNA和bcl-2的表達(dá)增加，但是JNK的磷酸化水平與假手術(shù)組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論: PVN注

6、射Apelin-13后對(duì)胃粘膜GI-RI具有顯著的加重作用，這種作用與胃粘膜細(xì)胞的增殖和凋亡有關(guān)。PVN注射Apelin-13通過(guò)增加胃粘膜細(xì)胞的JNK磷酸化水平從而抑制其下游的抗凋亡、促增殖的調(diào)控因子bcl-2的表達(dá)，提高促凋亡的調(diào)控因子bax的表達(dá)，來(lái)實(shí)現(xiàn)其作用。切除腹腔交感神經(jīng)節(jié)能拮抗Apelin-13的致?lián)p傷作用，這種拮抗作用可通過(guò)抑制JNK的磷酸化，影響下游的調(diào)控因子bcl-2、bax的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)。切斷膈下迷走神經(jīng)也能拮抗Ap