多功能PAMAM樹狀大分子雙載藥體系-合成、表征及腫瘤聯(lián)合治療應用研究.pdf

1、隨著納米技術(shù)的不斷發(fā)展及大量新型納米材料的出現(xiàn)，一些功能化納米材料已經(jīng)被用作藥物傳輸載體并顯示出極大的優(yōu)勢。在眾多的抗癌藥物載體體系中，以樹狀大分子作為平臺的載藥體系正成為目前的研究熱點。本課題以第五代聚酰胺-胺樹狀大分子(generation5Polyamidoaminedendrimer,G5PAMAMdendrimer)為藥物載體，分別構(gòu)建了用于癌癥治療的單藥以及雙藥藥物輸送體系。我們將不同官能團共價連接到樹狀大分子表面以改善其生

2、物相容性，并賦予其細胞內(nèi)定位和靶向輸送藥物的功能;將不同抗腫瘤藥物通過物理包裹或者化學鍵合的方式負載到功能化修飾的樹狀大分子上;并且詳細研究了功能化樹狀大分子載體和樹狀大分子載藥復合物的性質(zhì)及生物醫(yī)學應用。
　　本研究首先將抗腫瘤藥物α-Tos共價連接到樹狀大分子表面，通過局部乙?；磻泻土薌5PAMAM樹狀大分子表面的部分剩余氨基基團，并且將熒光標記物異硫氰酸熒光素(FI)和靶向試劑葉酸(FA)分別修飾到氨基基團上，得到了G5

3、.NHAcn-α-Tos-FI-FA載藥復合物，將其用于藥物的癌癥靶向治療研究。1HNMR和紫外等表征結(jié)果表明，成功制備出G5.NHAcn-α-Tos-FI-FA載藥復合物。MTT分析、細胞形態(tài)觀察、共聚焦顯微鏡觀察和流式細胞儀檢測技術(shù)結(jié)果顯示，dendrimer-α-Tos的抗腫瘤作用不但僅與α-Tos藥物本身相關(guān)，而且葉酸修飾的G5.NHAcn-α-Tos-FI-FA可特異性靶向葉酸受體過表達的KB細胞，從而表現(xiàn)出靶向抗腫瘤活性。<

4、br>　　之后，本研究分別通過化學鍵合α-Tos以及物理包裹抗腫瘤藥物阿霉素(DOX)，經(jīng)過部分乙酰化修飾后，再連接熒光標記物FI和靶向試劑FA，從而制得樹狀大分子雙載藥體系G5.NHAcn-α-Tos-FI-FA/DOX。1HNMR和紫外表征結(jié)果顯示，每個樹狀大分子負載了5個α-Tos藥物分子和4.1個DOX藥物分子。MTT分析和細胞形態(tài)觀察結(jié)果表明在給藥濃度下載藥復合物的生物活性僅與藥物有關(guān)，其中G5.NHAcn-α-Tos-FI-

5、FA/DOX對細胞的殺傷作用明顯優(yōu)于單藥復合物G5.NHAcn-FI-FA/DOX，表明了雙載藥體系G5.NHAcn-α-Tos-FI-FA/DOX的增強的藥物作用效果;體外釋放動力學研究結(jié)果表明該載藥復合物可緩慢持續(xù)釋放藥物DOX;共聚焦顯微鏡觀察和流式細胞儀檢測技術(shù)以及靶向MTT測試結(jié)果表明了雙載藥體系G5.NHAcn-α-Tos-FI-FA/DOX可對葉酸受體過表達的KB細胞靶向選擇并表現(xiàn)出特異性的治療效果。本章結(jié)果表明構(gòu)建雙載藥