包裹抗癌藥物的多功能PAMAM樹狀大分子-合成、表征及其在腫瘤靶向治療方面的應(yīng)用.pdf

1、我們報道了一種癌癥靶向治療的方法，即用多功能的聚酰胺-胺樹狀大分子來包裹抗癌藥物。在這種方法中，第五代的聚酰胺-胺樹狀大分子表面的氨基先修飾異硫氰酸熒光素和葉酸分子，再進(jìn)行剩余氨基的全部乙?；瘉碇泻推浔砻娴碾姾?。主要包括下面三個步驟:
　　 (1)將第五代聚酰胺-胺樹狀大分子(52.0mg，0.002mmol)溶解于5mL的DMSO溶液中，在攪拌的情況下，逐滴地加入5mL含F(xiàn)I(3.9mg，0.01mmol)的DMSO溶液。反應(yīng)

2、24h，將反應(yīng)溶液放入透析袋(MWCO=10，000)中，在PBS中透析3次，再在去離子水中透析3次，最后將透析袋中的溶液凍干即得G5.NH2-FI。
　　 (2)將FA(2.55mg，0.00577mmol)溶解在5mL的DMSO溶液當(dāng)中，然后加入EDC(22.1mg，0.1154mmol)，在室溫條件下攪拌反應(yīng)3h后，將混合溶液逐滴地加入到5mL含G5.NH2-FI(35.0mg，0.00115mmol)的DMSO溶液當(dāng)中，

3、攪拌反應(yīng)3天，將反應(yīng)溶液放入透析袋(MWCO=10，000)中，在PBS中透析3次，再在去離子水中透析3次，最后將透析袋中的溶液凍干即得G5.NH2-FI-FA。
　　 (3)將G5.NH2-FI-FA(26.3mg，0.00087mmol)溶解在5mL的DMSO溶液當(dāng)中，加入TEA(52.74mg，0.52128mmol)，然后逐滴地加入5mL含乙酸酐(44.35mg，0.4344mmol)的DMSO溶液中，攪拌反應(yīng)1天，將反

4、應(yīng)溶液放入透析袋(MWCO=10，000)中，在PBS中透析3次，再在去離子水中透析3次，最后將透析袋中的溶液凍干即得G5.NHAc-FI-FA。
　　 合成出的多功能的樹狀大分子(G5.NHAc-FI-FA)然后用來包裹抗癌藥物，2-甲氧基雌二醇(2-ME)或阿霉素(DOX)，以便將抗癌藥物靶向地傳遞到高葉酸受體表達(dá)的癌癥細(xì)胞表面。包裹方法見下:將10mgG5.NHAc-FI-FA溶解在1.5mL水中，十當(dāng)量的藥物溶于300μ

5、L甲醇中，將上述兩種溶液混合攪拌過夜使甲醇溶液充分蒸發(fā)，然后將混合溶液離心（7，000rpm，10min）。將沉淀即未包裹的藥物溶于1mL甲醇溶液做HPLC分析，從而確定藥物的負(fù)載量;上清液收集凍干從而得到G5.NHAc-FI-FA/藥物復(fù)合物。
　　 實驗結(jié)果與結(jié)論:HPLC分析發(fā)現(xiàn)，每個G5.NHAc-FI-FA分子可以包裹大約3.7個2-ME分子或是1.0個DOX分子，并且所形成的G5.NHAc-FI-FA/藥物復(fù)合物都是