聚酰胺—胺型樹(shù)狀大分子的合成及性能研究.pdf

1、樹(shù)狀大分子(dendrimers)是二十世紀(jì)后期出現(xiàn)的一類(lèi)新型的合成大分子。這類(lèi)大分子在結(jié)構(gòu)上具有球形、高度分枝、單分散性等特點(diǎn)。由于其結(jié)構(gòu)的特殊性，使樹(shù)狀大分子在生物領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用。特別是其作為基因載體的研究引起了人們的巨大興趣。聚酰胺-胺(polyamidoamine，PAMAM)樹(shù)狀大分子是最先得到深入研究并且引起廣泛關(guān)注的樹(shù)狀大分子。本文研究的目的是探討樹(shù)狀大分子的合成、修飾，并且將所合成的樹(shù)狀大分子包裹量子點(diǎn)應(yīng)用于生物熒光

2、探針，以及與PLGA復(fù)合制備納米基因載體方面的研究。研究結(jié)果主要包括：
　　 ⑴PAMAM 樹(shù)狀大分子的合成與修飾運(yùn)用重復(fù)交替的兩步反應(yīng)合成PAMAM樹(shù)狀大分子：先在樹(shù)狀大分子末端伯胺進(jìn)行Michael加成反應(yīng)，再在樹(shù)狀大分子末端酯基進(jìn)行酰胺化反應(yīng)。利用甲醇和乙酸乙酯混合溶劑作為淋洗劑對(duì)半代的樹(shù)狀大分子進(jìn)行柱層析分離，合成了從-0.5G-4.0G的PAMAM樹(shù)狀大分子。并且考察了樹(shù)狀大分子自身的熒光性能。為了增加樹(shù)狀大分子在基因

3、轉(zhuǎn)染過(guò)程中過(guò)膜能力，提高轉(zhuǎn)染效率，在樹(shù)狀大分子的外圍修飾不同取代度的疏水的十八碳酰，從而得到外圍帶有疏水長(zhǎng)鏈的3.0 G PAMAM。
　　 ⑵PAMAM 樹(shù)狀大分子與量子點(diǎn)的作用采用溶劑揮發(fā)法，制備了由表面活性劑和樹(shù)狀大分子包裹的水溶性核殼型CdSe/ZnS量子點(diǎn)熒光納米顆粒。通過(guò)透射電子顯微鏡(TEM)和熒光顯微鏡觀(guān)察發(fā)現(xiàn)，得到的水溶性量子點(diǎn)依然保持著原有量子點(diǎn)的熒光特性，并且顆粒大小均勻(100-150 nm)，分散性好，

4、可以用來(lái)標(biāo)記HeLa 細(xì)胞。
　　 ⑶樹(shù)狀大分子與PLGA的作用采用溶劑擴(kuò)散法制備了樹(shù)狀大分子PAMAM復(fù)合PLGA 納米分散液。在制備過(guò)程中，選擇合適的內(nèi)、外相體積是制備納米粒的關(guān)鍵所在。并且通過(guò)對(duì)納米粒的的zeta電位、臨界聚沉值以及pH 穩(wěn)定性的測(cè)量，可知在水相:有機(jī)相=12:1，表面活性劑濃度為1[％]時(shí)，可以得到粒徑為149.7 nm的納米分散液。在pH 值7～9 范圍內(nèi)，納米?？梢苑€(wěn)定存在，不發(fā)生團(tuán)聚。
　　

5、 ⑷PAMAM-PLGA納米粒對(duì)基因的轉(zhuǎn)染采用綠色熒光蛋白質(zhì)基因作為模型基因藥物，制備不同N/P 比的PAMAM-PLGA-DNA 納米粒并評(píng)價(jià)其轉(zhuǎn)染性能。瓊脂糖凝膠電泳阻滯實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在N/P＞3:1 起，DNA 所帶負(fù)電荷全部被中和，從而全部被阻滯在加樣孔中。體外基因轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)表明，納米粒能夠?qū)①|(zhì)粒Pvivo 2轉(zhuǎn)染至細(xì)胞內(nèi)，轉(zhuǎn)染效率比單純用3.0G PAMAM 載體要高，表明復(fù)合基因載體可以提高轉(zhuǎn)染效率。
　　 本文雖然考