BCRP，Survivin，Telomerase在HER2介導(dǎo)的乳腺癌多藥耐藥中的作用.pdf

1、分類號UDC密級編號中南大學(xué)Y997157CENTRALSOUTHUNIVERSITY碩士學(xué)位論文論文題目：娶￡星E墅gi!i墜，壁!Q蟲￡塑塑壟墼墼企昱數(shù)丑照痘壘葒邈葒主斂佳旦學(xué)科、專業(yè)：痘堡堂皇痘堡生壟堂研究生姓名：工洱。學(xué)院(系、所)：生直太堂勝疸硒塞壓導(dǎo)師姓名及專業(yè)技術(shù)職務(wù)：煎眢煎熬援2006年5月湖南長沙化療藥物的耐受性分別是對照組的21，545，312，232和287倍(P005)；(2)HER2表達(dá)干擾后，細(xì)胞BCRP、S

2、urvivin的表達(dá)均下調(diào)，telomerase活性降低，對Taxol、心C、VP一16、5一Fu和Mit的敏感性比未干擾組分別提高了143，48，564，262和343倍(PO05)。結(jié)果提示HER2介導(dǎo)的耐藥和耐藥逆轉(zhuǎn)與BCRP、Survivin的表達(dá)水平和telomerase活性相關(guān)。2髓R2調(diào)節(jié)BCRP的作用機(jī)制用pLNSX／HER2質(zhì)粒與含有BCRP啟動(dòng)子的熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染MCF7細(xì)胞，單光子檢測儀測定HER2對BC

3、RP轉(zhuǎn)錄活性的影響；用P13K／AKT信號通路特異性的抑制劑LY294002處理McF7／臟R2細(xì)胞，觀察該細(xì)胞BCRP表達(dá)及耐藥表型。結(jié)果顯示：(1)HER2可使BCRP報(bào)告基因中熒光素酶活性呈劑量依賴性增高(P005)；(2)P13K／AKT抑制劑LY294002下調(diào)MCF一7／HER2細(xì)胞BCRP的表達(dá)，并同時(shí)提高細(xì)胞對5一Fu、VP16、Mit的敏感性(P005)。提示IER2可能通過P13K／AKT信號途徑上調(diào)BCRP的轉(zhuǎn)錄表

4、達(dá)，進(jìn)而介導(dǎo)MCF一7細(xì)胞的多藥耐藥。3髓R2調(diào)節(jié)Survivin的作用機(jī)制首先用pLNSX／HER2質(zhì)粒與含有Survivin啟動(dòng)子的熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染酪氨酸激酶抑制劑AG825處理前后的MCF7細(xì)胞，其次用pLNSX／HER2質(zhì)粒與含有NF—KB啟動(dòng)子的熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒結(jié)合NF—KB抑制子pBabe／IrBa共轉(zhuǎn)染MCF7細(xì)胞，單光子分析儀檢測IER2對Survivin、NF—l‘B的轉(zhuǎn)錄活化作用；第三用NF—KB特異性

5、抑制劑MGl32處理MCF一7／HER2細(xì)胞，觀察該細(xì)胞Survivin蛋白表達(dá)水平的變化；第四用Survivin干擾片段轉(zhuǎn)染MCF_7／HER2細(xì)胞，觀察干擾前后Survivin的表達(dá)及藥物敏感性的變化。結(jié)果顯示：(1)HER2呈濃度依賴性轉(zhuǎn)錄活化Survivin啟動(dòng)子(P005)，酪氨酸激酶抑制劑AG825可劑量依賴性抑制這種活化；(2)HER2可轉(zhuǎn)錄活化NFKB啟動(dòng)子，而IKBQ可阻斷這種活化；(3)NFKB特異性抑制劑MGl32