Landau-Kleffner綜合征的預(yù)后特征及全基因組拷貝數(shù)變異的驗(yàn)證研究.pdf

1、第一部分:40例LKS患兒臨床表型及預(yù)后研究
　　目的:①回顧性分析LKS的臨床特征并進(jìn)行激素治療的前瞻性預(yù)后分析;②探討難治性LKS的臨床特點(diǎn)，對(duì)生酮飲食治療難治性LKS的療效進(jìn)行分析。
　　方法:2008年2月至2013年2月復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科診斷的40例LKS病例，1.回顧性分析40例LKS患兒的臨床表型，包括:失語特征、癲癇表型、認(rèn)知狀況和腦電圖特征;2.激素治療方法:甲基強(qiáng)的松龍15-20mg/kg.d靜

2、脈滴注，連用3天，暫停4天，重復(fù)3個(gè)療程，然后改為強(qiáng)的松口服2mg/kg.d×1月→1.5 mg/kg.d×1月→1 mg/kg.d×1月→0.5 mg/kg.d×1月→0.25mg/kg.d×1月→停用（療程5-6月）;3.自定療效評(píng)估方法，包括失語療效評(píng)估（患兒家長(zhǎng)記錄患兒失語起效時(shí)間、顯效時(shí)間、完全恢復(fù)正常時(shí)間或不再進(jìn)步時(shí)間）;LKS綜合療效評(píng)估（即不同療程LKS患兒的失語是否恢復(fù)正常、癲癇發(fā)作是否控制和/或ESES是否持續(xù)存在、

3、智力是否正常3項(xiàng)進(jìn)行Ⅰ級(jí)（完全恢復(fù)）～Ⅳ級(jí)（無效）綜合評(píng)分;4.分析難治性LKS病例臨床特征并給予生酮飲食治療（經(jīng)典約翰霍普金斯方案），觀察療效。
　　結(jié)果:1.一般資料:①40例患兒，男性20例，女性20例;就診年齡29個(gè)月～192個(gè)月（中位數(shù)62個(gè)月）;②失語發(fā)生年齡15個(gè)月～168個(gè)月（中位數(shù)50個(gè)月）;③確診病程10天～7年（中位數(shù)6個(gè)月）;2.臨床特征:(1)失語特征:①失語性質(zhì):40例患兒均存在聽覺性失認(rèn)及表達(dá)障礙，其

4、中表達(dá)障礙為主8例(20.0％)，聽覺性失認(rèn)為主32例(80.0％);②失語程度:完全性失語21例(52.5％)，部分性失語19例(47.5％);(2)癲癇特征:①癲癇發(fā)作27例(67.5％)，其中18例(66.7％)發(fā)生在失語之前，9例(33.3％)發(fā)生在失語之后;②癲癇發(fā)作類型:單一表型16例(59.3％)，多種表型11例(40.7％);(3)認(rèn)知評(píng)估:DST評(píng)估MI異常37例(92.5％)，正常范圍3例(7.5％);(4)腦電特征

5、:①背景活動(dòng):正常28例(70.0％)，輕度減慢12例(30.0％);②異常放電:發(fā)作性異常32例(80.0％);腦電圖無異常放電8例(20.0％);③ESES現(xiàn)象:10例(25.0％);3.預(yù)后分析:(1)31例患兒采用激素治療，①失語療效評(píng)估顯示各種療效出現(xiàn)的中位數(shù)分別為:開始進(jìn)步(T1)3周（30例），明顯進(jìn)步(T2)3個(gè)月（23例），恢復(fù)正常(T3)9個(gè)月（18例），不再進(jìn)步(T4)10個(gè)月（8例）;②綜合預(yù)后評(píng)估:1）多數(shù)病例

6、激素治療有效（隨著隨訪時(shí)間的延長(zhǎng)，Ⅰ級(jí)預(yù)后病例數(shù)逐漸增加，Ⅳ級(jí)預(yù)后的病例數(shù)為零）;2）Ⅰ級(jí)預(yù)后（即完全恢復(fù)）的患兒接近50％;3）18個(gè)月可作為療效結(jié)局的參考評(píng)估時(shí)間;(2)6例難治性LKS患兒（a.難治性癲癇，b.激素治療失語無效，c.智力低下）采用生酮飲食治療，3例因故退出，3例接受治療并隨訪，1例預(yù)后評(píng)分Ⅱ級(jí)（療程15個(gè)月），2例預(yù)后評(píng)分Ⅳ級(jí)（療程6～7個(gè)月）。
　　結(jié)論:①LKS的臨床表型復(fù)雜，容易誤診;②激素治療后多數(shù)L

7、KS患兒失語及認(rèn)知改善，預(yù)后不佳的難治性LKS的特征有待進(jìn)一步識(shí)別;③本研究嘗試的LKS綜合預(yù)后評(píng)估方法可以較全面的反映LKS患兒的預(yù)后狀況;④生酮飲食可作為部分難治性LKS的治療選擇。
　　第二部分:20例LKS患兒全基因組拷貝數(shù)變異的驗(yàn)證研究
　　目的:LKS病因及發(fā)病機(jī)制不明，推測(cè)其與遺傳有關(guān)，新的遺傳學(xué)研究方法全基因組拷貝數(shù)變異研究(Copy Number Variations，CNV)可用來探究可能的遺傳學(xué)機(jī)制。既

8、往采用SNP分型芯片（Affymetrix Genme-wide SNP Array6.0）對(duì)12例LKS患兒進(jìn)行了全基因組拷貝數(shù)變異研究，初步發(fā)現(xiàn)了一些可疑的與LKS的發(fā)生有關(guān)的CNV片段，但需要進(jìn)一步驗(yàn)證，本研究采用高密度芯片進(jìn)行比較基因組雜交技術(shù)(CGH)研究，繼續(xù)探究CNV在LKS的發(fā)生中起到的作用。
　　方法:①共收集了20例患兒及9例患兒核心家系的血標(biāo)本，采用了Gentra(R) Puregene(R)Blood Ki

9、t試劑盒進(jìn)行DNA抽提;②選用Agilent公司的高密度1×1M和2×400KSurePrint G3 Human CGH芯片對(duì)20例患兒及9對(duì)家長(zhǎng)的DNA進(jìn)行全基因組拷貝數(shù)變異檢測(cè);③用Agilent Genomic Workbench7.0.4對(duì)CNV進(jìn)行數(shù)據(jù)分析;④與基因組變異的數(shù)據(jù)庫(kù)DGV進(jìn)行比對(duì)，尋找罕見的CNV;⑤查閱文獻(xiàn)，進(jìn)行功能比對(duì)，篩選出與LKS的發(fā)生可能有關(guān)的CNV。
　　結(jié)果:1.20例患兒中的19例發(fā)現(xiàn)了共