YEATS4拷貝數(shù)變異對(duì)非小細(xì)胞肺癌預(yù)后的影響研究.pdf

1、目的：肺癌是全球患病率和死亡率均居首位的惡性腫瘤。2012年全球估計(jì)有180萬的肺癌新發(fā)病例，占所有新發(fā)癌癥病例的13％，而死于肺癌者高達(dá)160萬人。我國(guó)肺癌的患病率和死亡率也常年居高不下，且近年來呈上升趨勢(shì)，嚴(yán)重影響人們的健康。肺癌是受遺傳因素和環(huán)境因素共同作用的多因子性疾病。在遺傳因素中，體細(xì)胞遺傳變異如基因點(diǎn)突變、基因融合、單核苷酸多態(tài)性、基因拷貝數(shù)變異(CNV)已被證實(shí)是促進(jìn)肺癌發(fā)生發(fā)展的重要因素。本研究主要探究YEATS4基因

2、拷貝數(shù)變異在中國(guó)漢族非小細(xì)胞肺癌患者中存在的頻率，并探究其與病人術(shù)后生存和術(shù)后病情進(jìn)展的關(guān)聯(lián)，為臨床上尋找能夠判斷非小細(xì)胞肺癌預(yù)后的特異性生物標(biāo)志物提供線索。
　　方法：本研究采用二階段研究設(shè)計(jì)。第一階段篩選合適的檢測(cè)YEATS4基因區(qū)域拷貝數(shù)變異的引物。首先設(shè)計(jì)覆蓋YEATS4全基因區(qū)域的系列引物；然后檢測(cè)106例肺腺癌癌組織中各引物對(duì)應(yīng)的CNV頻率，根據(jù)頻率差異篩選合適的引物進(jìn)行二階段分析。第二階段采用熒光定量實(shí)時(shí)PCR檢測(cè)6

3、15例非小細(xì)胞肺癌癌組織中 YEATS4 CNV頻率，分析其在腺癌和鱗癌中的分布，然后按腺癌和鱗癌分層，探究YEATS4 CNV與患者術(shù)后生存和術(shù)后病情進(jìn)展的關(guān)聯(lián)。
　　結(jié)果：
　　1.第一階段：在106例肺腺癌中，primer1，primer5，primer8以及primer11對(duì)應(yīng)的CNV片段出現(xiàn)的頻率分別為19.81%，54.29%，69.52%和59.43%。Primer1與primer5，primer8和prime

4、r11對(duì)應(yīng)的CNV片段出現(xiàn)的頻率存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.001），而primer5與primer8，primer5與 primer11以及primer8與primer11這三對(duì)引物對(duì)應(yīng)的CNV頻率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，因此篩選出primer1和primer11進(jìn)行第二階段大樣本分析。
　　2.第二階段：二階段熒光定量實(shí)時(shí)PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，primer1對(duì)應(yīng)的CNV片段在腺癌中出現(xiàn)的頻率為35.83%，在鱗癌中為46.46%，經(jīng)卡方檢驗(yàn)兩

5、者存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.008）。primer11對(duì)應(yīng)的CNV片段在腺癌中出現(xiàn)的頻率為64.50%，在鱗癌中為65.12%，兩者間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.873)。單因素分析顯示，primer1 CNV與肺腺癌和鱗癌的術(shù)后生存以及病情進(jìn)展均無統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)聯(lián)，而primer11 CNV是肺鱗癌術(shù)后生存（HR=0.47，95%CI：0.31-0.72，P=0.0005）和術(shù)后病情進(jìn)展（HR=0.61，95%CI：0.42-0.90，P=0.01

6、2）的保護(hù)因素。多因素分析顯示，在調(diào)整年齡、性別、吸煙以及腫瘤TNM分期后，primer11對(duì)應(yīng)的拷貝數(shù)擴(kuò)增是肺鱗癌術(shù)后生存（HR=0.48，95%CI：0.31-0.73，P=0.0005）和術(shù)后病情進(jìn)展（HR=0.61，95%CI：0.42-0.90，P=0.012）的保護(hù)因素。
　　結(jié)論：YEATS4基因在非小細(xì)胞肺癌組織中拷貝數(shù)擴(kuò)增頻率較高，在肺腺癌和肺鱗癌組織中的分布有差異。YEATS4基因上CNV存在多態(tài)性，且位于基因