益賽普對(duì)哮喘大鼠的抗炎作用研究.pdf

1、目的：腫瘤壞死因子-α(TNF-α)與哮喘密切相關(guān)，運(yùn)用TNF免疫調(diào)節(jié)劑（益賽普）對(duì)哮喘大鼠進(jìn)行干預(yù)，通過比較各組試驗(yàn)大鼠炎癥指標(biāo)及細(xì)胞因子水平，探討益賽普對(duì)哮喘大鼠的抗炎作用及其可能機(jī)制。
　　 方法：按照隨機(jī)分組的原則，將30只SD 雄性大鼠隨機(jī)分組成3組，分別為哮喘組、益賽普組、對(duì)照組，每組10只。（1）哮喘組：于第1天、第8天及第15天分別給予無菌腹腔注射10％卵清蛋白(OVA)1 ml和氫氧化鋁100 mg的懸液致敏。

2、后于第16、17、18天置于密閉霧化罐中用1％OVA 霧化吸入激發(fā)。每天激發(fā)20分鐘致其出現(xiàn)喘息、呼吸急促或呼吸困難。（2）益賽普組：誘喘方法同哮喘組，從第1天開始（致敏或激發(fā)后1小時(shí)）每隔1天，給予皮下注射益賽普0.5mg/kg。（3）對(duì)照組：以生理鹽水代替OVA和益賽普。在末次激發(fā)后24小時(shí)，處死大鼠，收集肺組織及氣道灌洗液（BALF）。后將BALF離心后分離沉淀細(xì)胞及上清，并將肺組織經(jīng)脫水透明、石蠟包埋等處理后制作成肺標(biāo)本切片。運(yùn)

3、用Elisa方法對(duì)BALF上清中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平進(jìn)行測定，以及用改良牛氏計(jì)數(shù)臺(tái)對(duì)BALF沉淀細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)并將沉淀細(xì)胞涂片染色后進(jìn)行分類計(jì)數(shù)。運(yùn)用免疫組織化學(xué)方法技術(shù)測定大鼠肺組織標(biāo)本IL-4水平。最后通過統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對(duì)各組指標(biāo)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析比較。
　　 結(jié)果：益賽普組大鼠BALF中TNF-α水平（196±13 pg/ml）較哮喘組（236±8 pg/ml）有明顯降低（p<0.01），細(xì)胞總數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞和中性粒細(xì)