5-脂氧酶在大鼠全腦缺血海馬神經(jīng)元損傷中的作用.pdf

1、腦缺血中老年人常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病,致死致殘率高,因此,深入研究腦缺血損傷的病理生理機(jī)制及抗損傷藥物,已成為當(dāng)前神經(jīng)科學(xué)研究的一項(xiàng)重要任務(wù)。5-脂氧酶(5-LOX)是重要炎癥介質(zhì)白三烯類(LTs)的合成限速酶,近年研究表明,5-LOX參與局灶性腦缺血損傷過程。但是,5-LOX是否參與因心臟意外、休克和缺氧等情況引起的全腦缺血損傷及其變化特點(diǎn)尚未闡明,5-LOX能否作為全腦缺血損傷治療的靶點(diǎn)尚待研究。
　　 本研究目標(biāo):在大鼠全

2、腦缺血模型,闡明全腦缺血后海馬神經(jīng)元損傷(全腦缺血最敏感部位)及5-LOX的表達(dá)及分布改變；在此基礎(chǔ)上,進(jìn)一步觀察5-LOX選擇性抑制劑zileuton對全腦缺血后海馬神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用。
　　 第一部分大鼠全腦缺血后海馬神經(jīng)元損傷及5-LOX的表達(dá)改變
　　 目的:在大鼠全腦缺血模型,觀察全腦缺血后腦海馬神經(jīng)元損傷及海馬5-LOX表達(dá)和分布變化。
　　 方法:以雙側(cè)頸總動脈阻斷(BCCAO)結(jié)合降壓藥誘導(dǎo)大鼠

3、全腦缺血模型,觀察腦缺血后海馬神經(jīng)元的損傷變化；應(yīng)用Western blot方法檢測腦缺血后5-LOX的表達(dá)改變；應(yīng)用免疫組織化學(xué)及免疫熒光雙標(biāo)染色方法觀察5-LOX的分布特征。
　　 結(jié)果:大鼠全腦缺血10-30 min再灌注后3-14 d,海馬產(chǎn)生遲發(fā)性神經(jīng)元死亡(其中以海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞損害最明顯),最適當(dāng)?shù)臅r(shí)間是缺血20 min再灌注3 d。Western blot結(jié)果顯示,大鼠全腦缺血再灌注后1 d-7 d,海馬5-

4、LOX表達(dá)明顯增高,并于3 d達(dá)高峰。免疫組織化學(xué)和免疫熒光雙標(biāo)結(jié)果表明,海馬CA1神經(jīng)元表達(dá)5-LOX蛋白,并在全腦缺血發(fā)生核移位現(xiàn)象。
　　 結(jié)論:5-LOX參與全腦缺血再灌注誘導(dǎo)的海馬神經(jīng)元損傷,抑制5-LOX可能減輕全腦缺血損傷。
　　 第二部分5-LOX抑制劑zileuton對全腦缺血后海馬神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用
　　 目的:觀察5-LOX選擇性抑制劑zileuton對全腦缺血海馬神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用。<

5、br>　　 方法:以BCCAO20 min再灌注3 d建立大鼠全腦缺血模型.5-LOX選擇性抑制劑zileuton(10,30,50 mg/kg)灌胃給藥。Morris水迷宮(MWM)實(shí)驗(yàn)檢測大鼠空間記憶能力,HE染色觀察海馬神經(jīng)元病理變化。
　　 結(jié)果:5-LOX抑制劑zileuton(30,50 mg/kg,缺血前后2 h灌胃給藥,以后每日2次,共3 d)能顯著減少全腦缺血后3 d海馬神經(jīng)元死亡；zileuton(30 m