BORIS和CT45兩種新的CT抗原單克隆抗體的制備及其蛋白水平表達(dá)和分布的初步研究.pdf

1、隨著腫瘤免疫學(xué)的發(fā)展，越來(lái)越多的腫瘤相關(guān)抗原被應(yīng)用于腫瘤的免疫研究中。腫瘤/睪丸抗原（Cancer/Testis Antigens, CTA）具有可局限性表達(dá)于腫瘤組織并且可以在腫瘤患者體內(nèi)引起免疫反應(yīng)等特點(diǎn),因而成為近年來(lái)腫瘤免疫研究的熱點(diǎn)。但是目前CT 抗原的研究大多停留在DNA 及mRNA 的水平上，蛋白水平上的研究還相對(duì)滯后，主要原因是缺乏特異性強(qiáng)﹑敏感性高的單克隆抗體。 BORIS 和CT45 是兩種新近發(fā)現(xiàn)的CT 抗

2、原，為了進(jìn)一步在蛋白水平上對(duì)其進(jìn)行研究，我們首次制備BORIS 及CT45 的單克隆抗體，并對(duì)其在蛋白水平上的表達(dá)和分布進(jìn)行了初步的研究。 應(yīng)用淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)，制備和鑒定了BORIS 和CT45 兩種CT 抗原的單克隆抗體，并篩選出特異性強(qiáng)及敏感性高能識(shí)別天然抗原的相應(yīng)單克隆抗體：FMU-BORIS13 和CT45-03，免疫組織化學(xué)染色最佳工作濃度分別為4.5μg/ml 和2.6μg/ml。以獲得的單抗為工具，運(yùn)用免疫組織

3、化學(xué)染色的方法在睪丸組織﹑正常乳腺組織﹑乳腺良性疾病組織﹑乳腺癌及肺癌組織上對(duì)兩種CT 抗原在蛋白水平上的分布進(jìn)行了初步的研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在睪丸組織中：兩種CT 抗原主要分布在生精細(xì)胞發(fā)育的早期即主要表達(dá)在精原細(xì)胞及初級(jí)精母細(xì)胞的細(xì)胞核中。在乳腺癌組織中BORIS 呈高水平的表達(dá)，表達(dá)率為85.5％ (94/110)；在正常乳腺組織及乳腺良性疾病組織中也檢測(cè)到了BORIS 的表達(dá),但表達(dá)水平遠(yuǎn)低于乳腺癌組織；在肺癌組織中CT45 表達(dá)百分