奧沙利鉑作用結(jié)腸癌細(xì)胞的差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、浙江理工大學(xué)碩士學(xué)位論文奧沙利鉑作用結(jié)腸癌細(xì)胞的差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究姓名：姚毅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：趙輔昆20080301浙江理_ T 大學(xué)碩+ 學(xué)位論文A b s t r a c tO x a l i p l a t i ni s at h i r d - g e n e r a t i o n p l a t i n u m c o m p o u n d w h i c h i s w i d e l

2、 y u s e d i n m a n ya d v a n c e dC a n C e l “ c h e m o t h e r a p y ．A t p r e s e n t ，t h e r e i s l i t t l e i n f o r m a t i o nr e g a r d i n gt h em o l e c u l a rm e c h a n i s m so f o x a l i p l a

3、t i n a c t i o n a g a i n s tc a n c e rc e l l s ．W e u s e d t w o c o l o n c a n c e r c e l ll i n e s ，H T 2 9a n d S W 6 2 0 ，a s i nv i t r om o d e l s ．I n h i b i t i o no f c e l lp r o l i f e r a t i o nW

4、 a sm e a s u r e db y M T Ta s s a y ．M o r p h o l o g yc h a n g e s w e r eo b s e r v e d b yo p t i c a lm i c r o s c o p y ．I n d u c t i o no f c e l l a p o p t o s i sw a s d e t e c t e db yA O ／E Bs t a i n

5、i n ga n d f l o w c y t o m e t r ya n a l y s i s ．O nt h eb a s eo fa b o v es t u d y ，w ea n a l y z e dt h ed i f f e r e n t i a lp r o t e o m i c sb e f o r ea n da f t e ro x a l i p l a t i nt r e a t m e n t

6、，t of u r t h e rs t u d yt h ep r o t e i ns y n t h e s i z a t i o ne f f e c t so f o x a l i p l a t i ni nc a n c e rc e l l s ．I nt h e2 - D Ed i f f e r e n t i a lp r o t e i np r o f i l e s ，w ef o u n d 9 2 o

7、 r8 1 ，i nH T 2 9o rS W 6 2 0 c e l l l i n e sr e s p e c t i v e l y ，d i f f e r e n t i a l l ye x p r e s s e dp r o t e i ns p o t sb e t w e e no x a l i p l a t i n - u n t r e a t e da n d —t r e a t e dc o l o

8、nc a n c e r c e l l l i n e s ，o fw h i c h7 1 o r 6 4s p o t sw e r ei d e n t i f i e db yM A L D I —T O F - T O FM Sa n a l y s i s ．E v e n t u a l l y ，t h e r ew e r e5 9 o r5 5 d i f f e r e n t i a l l ye x p r

9、e s s e dp r o t e i n si nt h e s ei d e n t i f i e dp r o t e i n s ．I n t e r e s t i n g l y ，4 6m u t u a ld i f f e r e n t i a l l ye x p r e s s e d p r o t e i n sw e r ef o u n di nb o t hc e l ll i n e s ，i n

10、 c l u d i n g2 6u p - r e g u l a t e dp r o t e i n sa n d2 0d o w n - r e g u l a t e dp r o t e i n s ．M a n yo f t h e s ep r o t e i n sa r ei n v o l v e d i n t r a n s c r i p t i o n ／t r a n s l a t i o n r e

11、g u l a r a c t i v i t y , e n z y m e a c t i v i t y ，s i g n a l t r a n s d u c t i o n ，d i v e r s i f i e d m e t a b o l i s m o r c e l l g r o w t h ／m a i n t e n a n c e ．S o m e o f p r o t e i n s p l a y

12、av i t a l r o l e a sc h a p e r o n e so ra n c h o r p r o t e i n s ．A m o n g t h e s em u t u a ld i f f e r e n t i a l l ye x p r e s s e d p r o t e i n s ，f o u rp r o t e i n s ，E z r i n ，H s p 2 7 ，F(xiàn) o r t i

13、 l i n ，a n d C y t o k e r a t i n 一18 ( C K 一1 8 ) ，w e r ef u r t h e rc o n f i r m e d b y w e s t e r n b l o t ，d u et ot h e i r d e s c r i b e d o rp o t e n t i a l r e l a t i o n t o t u m o r p r o g r e s

14、s s u c h a s a p o p t o s i s a n d s i g n a l t r a n s d u c t i o n ．E x c e l l e n tc o r r e l a t i o nW a sf o u n db e t w e e n 2 - D Ea n a l y s i sa n di m m u n o b l o tr e s u l t s ，i n d i c a t i n

15、gt h er e l i a b i l i t yo f t h ea n a l y s i s ．T h i s s t u d y r e s u l t s w i l l p r o v i d e n e w c l u e s t o u n d e r s t a n d t h e m o l e c u l a r m e c h a n i s m su n d e r l y i n g o x a l i