奧沙利鉑對(duì)不同轉(zhuǎn)移潛能的人結(jié)腸癌細(xì)胞株增殖和凋亡的影響.pdf

1、目的:
　　探討奧沙利鉑（L-OHP）體外對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞SW480和SW620增殖和凋亡的影響及其可能機(jī)制。
　　方法:
　　1.MTT比色法檢測(cè)用不同質(zhì)量濃度(2、4、8、16、32和64μ g/mL)L-OHP與SW480和SW620細(xì)胞作用24、48和72 h后對(duì)增殖抑制作用的影響。
　　2.DAPI染色觀(guān)察經(jīng)不同質(zhì)量濃度（4、16和64μ g/mL）L-OHP處理24 h后細(xì)胞核形態(tài)的變化。
　　3

2、.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)用不同質(zhì)量濃度（1/2IC50和IC50）L-OHP處理24 h后SW480和SW620細(xì)胞周期和凋亡率。
　　4.Western blot法檢測(cè)經(jīng)不同質(zhì)量濃度（4、16和64μ g/mL）L-OHP處理24 h后SW480和SW620細(xì)胞中凋亡相關(guān)蛋白Bax和Caspaes-3蛋白的表達(dá)水平以及DNA損傷相關(guān)蛋白γ HA2X蛋白的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　1.L-OHP對(duì)SW480和SW620細(xì)胞的

3、增殖有明顯的抑制作用且呈時(shí)間-劑量依賴(lài)性（P＜0.05）。SW620細(xì)胞對(duì)L-OHP的敏感性明顯高于SW480細(xì)胞（P＜0.05）。
　　2.L-OHP作用于SW480和SW620細(xì)胞24 h后，隨著藥物濃度的增加正常細(xì)胞數(shù)目減少，出現(xiàn)細(xì)胞核固縮、多核、核碎裂及凋亡小體的細(xì)胞數(shù)目明顯增加（P<0.05）。相同濃度L-OHP作用下，SW620細(xì)胞中出現(xiàn)細(xì)胞核固縮、多核、核碎裂及凋亡小體的細(xì)胞的比例明顯較SW480細(xì)胞中高（P<0.0

4、5）。
　　3.L-OHP對(duì)SW480和SW620細(xì)胞的有明顯的促進(jìn)早期凋亡的作用且呈時(shí)間-劑量依賴(lài)性（P＜0.05）。相同濃度 L-OHP作用下對(duì) SW620細(xì)胞促進(jìn)早期凋亡的作用明顯大于SW480細(xì)胞（P<0.05）。
　　4.自然對(duì)數(shù)增殖周期，SW620細(xì)胞 S期細(xì)胞比例低于 SW480細(xì)胞，而G1期細(xì)胞比例高于SW480細(xì)胞（P<0.05）。用不同質(zhì)量濃度的L-OHP（1/2IC50、IC50）作用24 h,SW48

5、0細(xì)胞G1期細(xì)胞比例隨濃度增高而顯著降低，G2/M期細(xì)胞比例顯著升高（P<0.05），SW620細(xì)胞G1期細(xì)胞比例隨濃度增高而顯著降低。S期細(xì)胞比例顯著升高（P<0.05）。
　　5.L-OHP作用于SW480和SW620細(xì)胞24 h后，隨著藥物濃度的增加SW480和SW620細(xì)胞中凋亡相關(guān)蛋白Bax和Caspase-3蛋白以及DNA損傷相關(guān)蛋白γHA2X蛋白的表達(dá)量明顯增加（P<0.05）。相同藥物濃度下SW620細(xì)胞中凋亡相關(guān)

6、蛋白Bax和Caspase-3蛋白以及DNA損傷相關(guān)蛋白γ HA2X蛋白的表達(dá)量明顯較SW480高（P<0.05）。
　　結(jié)論:
　　1.L-OHP對(duì)二種結(jié)腸癌細(xì)胞株都有明顯的增殖抑制作用，且對(duì) SW620細(xì)胞的抑制作用明顯大于SW480細(xì)胞。
　　2.L-OHP主要通過(guò)阻滯細(xì)胞于G2/M期或S期抑制二種腫瘤細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。
　　3.L-OHP誘導(dǎo)二種腫瘤細(xì)胞凋亡的機(jī)制可能是通過(guò)上調(diào)促凋亡蛋白Bax和啟動(dòng)