染料木黃酮對人結(jié)腸癌SW620細(xì)胞株增殖、凋亡影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究染料木黃酮(genistein，Gen)對人結(jié)腸癌SW620細(xì)胞株增殖、凋亡、細(xì)胞周期分布及其對SW620細(xì)胞Survivin和Bcl-2mRNA表達(dá)的影響，探討Gen在SW620細(xì)胞凋亡過程中可能的作用機(jī)制。
　　方法：體外培養(yǎng)人結(jié)腸癌SW620細(xì)胞株：1.用MTT法檢測不同濃度(6.25μmol/L、12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)的Gen處理SW620細(xì)胞后，SW620

2、細(xì)胞的生長抑制效應(yīng)；2.流式細(xì)胞技術(shù)檢測不同濃度(25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)的Gen處理SW620細(xì)胞48h后，SW620細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期分布的變化；3。逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶連反應(yīng)(RT-PCR)檢測不同濃度(25μmaol/L、50μmol/L、100μmol/L)的Gen作用于SW620細(xì)胞48h后，Gen對SW620細(xì)胞Survivin、Bcl-2 mRNA表達(dá)的影響。4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果用SPSS19.0進(jìn)行統(tǒng)

3、計分析，以P<0.05作為有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果：1.MTT結(jié)果顯示，不同濃度(6.25μmol/L、12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)的Gen作用于SW620細(xì)胞24h、48h、72h后，均可抑制SW620細(xì)胞的增殖；且隨著Gen濃度的增加和作用時間的延長，Gen對SW620細(xì)胞增殖的抑制作用逐漸增強(qiáng)，呈現(xiàn)出時間-濃度依賴性，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。2.不同濃度(25μmol/L、50

4、μmol/L、100μmol/L)的Gen對SW620細(xì)胞作用48h后，SW620細(xì)胞凋亡及周期分布檢測：不用濃度(25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)的Gen作用于SW620細(xì)胞48h后，其早期凋亡率和晚期凋亡率明顯增高；隨著Gen濃度的增加，SW620細(xì)胞的早期凋亡率和晚期凋亡率也逐漸增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；隨著Gen濃度的不斷增高，細(xì)胞周期分布發(fā)生明顯的變化，表現(xiàn)為G0/G1期細(xì)胞數(shù)目比例逐漸下

5、降，S期細(xì)胞細(xì)胞數(shù)目比例明顯上升，G2/M期細(xì)胞數(shù)目逐漸減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，提示隨著Gen濃度的增高可使SW620細(xì)胞被阻滯在S期，3.RT-PCR結(jié)果顯示，不同濃度(25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)的Gen作用于SW620細(xì)胞48h后，Survivin、Bcl-2 mRNA在人結(jié)腸癌SW620細(xì)胞中的表達(dá)均下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論：1.Gen在一定的濃度范圍內(nèi)