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文檔簡介
1、研究背景:
結(jié)腸癌(ColonCancer,CC)是臨床上常見的惡性腫瘤之一,嚴重威脅人類的生命健康。傳統(tǒng)的外科手術及化療或放療等方法都有其局限性,需要我們尋找治療結(jié)腸癌的新方法。研究表明熱休克蛋白90(Heatshockprotein90,HSP90)是細胞內(nèi)重要的分子伴侶之一,參與細胞內(nèi)多種蛋白的折疊、裝配及轉(zhuǎn)運,對腫瘤的發(fā)生發(fā)展起著重要作用,已成為治療腫瘤的新靶點。本實驗通過研究HSP90抑制劑17-二甲胺乙胺基-1
2、7-去甲氧基格爾德霉素(17-dimethylaminoethy-lamino-17-demethoxygeldanamycin,17-DMAG)對結(jié)腸癌SW620細胞的作用,為結(jié)腸癌的治療尋找新途徑。
目的:
研究HSP90新型抑制劑17-DMAG對結(jié)腸癌細胞株SW620增殖及凋亡的影響,并對其機制作初步探討。
方法:
以不同濃度的17-DMAG作用于對數(shù)生長期的結(jié)腸癌SW620
3、細胞,顯微鏡下觀察細胞凋亡形態(tài)學變化;應用CCK8法檢測其吸光度值,并計算細胞生長抑制率;采用流式細胞儀分析各組細胞的細胞周期變化;以AnnexinV-FITC和PI雙染法檢測各組細胞凋亡率的變化。
結(jié)果:
光學顯微鏡觀察到17-DMAG藥物處理組的細胞出現(xiàn)細胞凋亡現(xiàn)象。CCK8法顯示17-DMAG對結(jié)腸癌SW620細胞株的生長增殖有抑制作用,并呈時間-劑量依賴性(P<0.05)。Annexin-FITC/P
4、I雙染色法檢測結(jié)果顯示17-DMAG濃度為1.0umol/L、2.5umol/L、5.0umol/L的細胞凋亡率分別為30.03%、50.50%和77.23%,與對照組相比有顯著性差異(P<0.05)。流式細胞儀細胞周期分析顯示,經(jīng)17-DMAG藥物處理過的不同濃度的藥物組與對照組比較,G0/G1期細胞比例顯著上升,S期細胞比例下降,G2/M期細胞比例顯著上升,P<0.05,有統(tǒng)計學差異;但各濃度17-DMAG藥物組間比較,G0/G1期
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