三個血友病B家系的基因突變分析及攜帶者檢測.pdf

1、目的:血友病B是一種嚴(yán)重危害人類健康的遺傳病,通過對3個血友病B家系的FⅨ基因進(jìn)行突變分析,建立簡易、準(zhǔn)確和快速的血友病B基因診斷實驗室方法;以揭示這些家系患者發(fā)病的分子機(jī)制;并判斷攜帶者以預(yù)防患兒的出生,減少血友病B的發(fā)病率;同時在法醫(yī)鑒定中明確傷病關(guān)系也有一定實踐意義。
　　 方法:收集3個血友病家系臨床資料和血樣,提取基因組DNA。采用PCR擴(kuò)增凝血因子Ⅸ的8個外顯子及其側(cè)翼序列并進(jìn)行DNA序列分析;利用FIX基因外6個多

2、態(tài)性和雜合率高的短串聯(lián)重復(fù)序列(short tandem repeat,STR):DXS102、DXS1192、DXS1211、DXS1227、DXS8013和DXS8094,進(jìn)行連鎖分析。
　　 結(jié)果:序列分析表明家系1患者存在突變6409 G→A,導(dǎo)致第12位甘氨酸Gly突變?yōu)榫彼酇rg;待檢女性Ⅲ3第6409位堿基為“G”,為正常女性:家系2患者存在突變6364C→T,導(dǎo)致第-4位精氨酸Arg突變?yōu)樯彼酺rp;待檢女性

3、Ⅱ9第6364位堿基為“C”,為正常女性;而Ⅲ6攜帶該位點的雜合突變;家系3患者存在30383 G→C,導(dǎo)致第135位纈氨酸Val突變?yōu)榱涟彼酟eu,待檢女性Ⅱ2第30383位堿基為“G”,為正常女性。DXS8094和DXS1211基因座連鎖分析結(jié)果顯示家系1的Ⅲ3獲得正常的X染色體;DXS1211和DXS102基因座連鎖分析結(jié)果支持家系2的Ⅱ9獲正常的X染色體,而Ⅲ6獲得與致病的X染色體。
　　 結(jié)論:替換突變是這三個血友病B