黃瓜立枯病拮抗木霉菌篩選及主要生防機(jī)理研究.pdf

1、本研究將采自山東、廣東、廣西、北京、甘肅、云南、越南等7個(gè)省份的土樣，通過(guò)平板稀釋法，分離出323株木霉菌菌株；通過(guò)對(duì)峙培養(yǎng)、耐性測(cè)定和防治效果的比較，篩選出一株優(yōu)良木霉菌，定名為T(mén)05-049；根據(jù)在MA培養(yǎng)基上的培養(yǎng)性狀和分子孢子梗、小瓶梗及孢子的特征，初步鑒定為擬康氏木霉。 試驗(yàn)中測(cè)定了T05-049的基礎(chǔ)生物學(xué)特性。通過(guò)正交試驗(yàn)L934，確定該菌株生長(zhǎng)的最優(yōu)培養(yǎng)基配方為：麥芽糖18g、蛋白胨6g、KH2PO41g、KNO

2、31g、VB20.2g，瓊脂20g；在最優(yōu)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)，可以生長(zhǎng)的溫度范圍為5～35℃，適合菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢和孢子萌發(fā)的溫度范圍為15～30℃，最適溫度是25～30℃；pH值范圍為4～11，最適pH為5、6；光照與菌絲生長(zhǎng)無(wú)關(guān)，但有利于產(chǎn)孢。 室內(nèi)盆栽試驗(yàn)，研究了T05-049對(duì)黃瓜苗期立枯病的防治機(jī)理。該菌株具有較強(qiáng)的空間、營(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)和重寄生能力，其菌絲可以纏繞、穿插、緊貼等方式寄生于立枯絲核菌R15菌絲上，最終使菌絲斷裂、解體

3、直至死亡。該菌株能夠極快地在黃瓜苗根部定殖，同時(shí)抑制R15的定殖，說(shuō)明該菌株是在抑制病原菌生長(zhǎng)的基礎(chǔ)上防治立枯病的。 T05-049能夠產(chǎn)生揮發(fā)性和非揮發(fā)性抗生物質(zhì)來(lái)抑制R15的生長(zhǎng)，其中起主要作用的是非揮發(fā)性抗生物質(zhì)。其揮發(fā)性抗生物質(zhì)的抑菌率僅為23.5％，其非揮發(fā)性抗生物質(zhì)含量為0.1％時(shí)其抑菌率就達(dá)61.3％。 T05-049能夠誘導(dǎo)黃瓜苗POD、CAT等抗氧化酶活性的提高，增加可溶性蛋白的含量，減少M(fèi)DA的含量，

4、從而減少活性氧對(duì)黃瓜苗造成的傷害，增強(qiáng)黃瓜苗的抗病性。該菌株誘導(dǎo)黃瓜苗產(chǎn)生抗病性的特點(diǎn)，在苗期更為顯著。 T05-049在黃瓜苗根部的施入，使根際真菌、放線(xiàn)菌和優(yōu)勢(shì)細(xì)菌的數(shù)量明顯減少(同時(shí)也促進(jìn)了個(gè)別菌種數(shù)量的增加)，數(shù)量明顯減少的多為病原菌。通過(guò)對(duì)峙培養(yǎng)，進(jìn)一步證明了該菌株具有較廣的抑制病原菌的能力。 T05-049和其它木霉菌種間有或無(wú)協(xié)同作用，說(shuō)明木霉菌間的協(xié)同作用具有種間的差異。該菌株和多菌靈之間具有協(xié)同作用，不

5、僅能增強(qiáng)防治效果，還能夠減少藥劑的施用量。 T05-049能夠明顯的促進(jìn)黃瓜苗的生長(zhǎng)，具有防病促生作用，使植株粗壯、葉面積增大、葉片增厚、葉綠素含量增加、光合作用增強(qiáng)。其原因是多方面的，如培養(yǎng)木霉菌的麩皮培養(yǎng)基或該菌株在抑制病原菌的過(guò)程中產(chǎn)生的一些物質(zhì)，或誘導(dǎo)黃瓜苗本身抗病性的增強(qiáng)，或根際微生物結(jié)構(gòu)的變化，都可能對(duì)植株生長(zhǎng)產(chǎn)生影響。表明該菌株促進(jìn)黃瓜苗的生長(zhǎng)是多種機(jī)理協(xié)同作用的結(jié)果。 本論文進(jìn)行了木霉菌株的篩選，并進(jìn)一步