高效拮抗木霉菌的篩選及拮抗效果評價.pdf

1、木霉是重要的生防真菌，廣泛分布于土壤、海洋及植物體等各種基質(zhì)上。分布于土壤中的木霉菌，有很多種類對土傳病害具有良好的抑制效果。本研究擬從土壤中分離木霉菌株，以小麥紋枯病菌和根腐病菌作為靶標菌，篩選高效拮抗木霉菌株，并探討其促生防病效果，主要研究結(jié)果如下：
　　1、高效拮抗木霉菌株的篩選
　　2012年至2013從山東濟寧、德州、聊城、菏澤、泰安、淄博、濱州、濰坊等地采集小麥田根部土壤，用稀釋平板法分離獲得70株木霉菌，再利用

2、本實驗室以前篩選保存的10株優(yōu)良木霉菌株，共計80株。在此基礎(chǔ)上，以小麥紋枯病菌（Rhizoctonia cerealis） WK-207作為指示菌，從中篩選出7株對小麥紋枯病菌抑制效果較好的木霉菌株；復(fù)篩時，選擇4種病原菌作為指示菌，分別是小麥紋枯病菌WK-207、黃色鐮孢菌（Fusarium culmorum）WF-25、層出鐮孢菌（Fusarium proliferatum）JM-4、尖孢鐮孢菌（Fusarium oxysporu

3、m）WF-51，測定7株木霉菌株的生防效果，同時還對7株木霉菌株的生長速度、抑制率、耐溫性、耐酸堿性、產(chǎn)孢量、揮發(fā)性等進行了測定，采用灰色關(guān)聯(lián)的方法對選定的7株木霉菌株進行綜合評價。結(jié)果表明，木霉菌株H18-1-1的灰色關(guān)聯(lián)度最大，為0.7751，其次是TF28菌株，關(guān)聯(lián)度為0.7727。表明H18-1-1和TF28這兩個木霉菌株的綜合性狀與構(gòu)建的理想?yún)⒖季杲咏潭容^大，是較好的生防菌株。
　　2、H18-1-1和 TF28木霉

4、菌株的鑒定
　　利用形態(tài)特征和5.8SrDNA-ITS序列分析相結(jié)合的方法對高效拮抗木霉菌株 TF28和H18-1-1進行鑒定，結(jié)果表明：TF28和H18-1-1菌株在PDA培養(yǎng)基上菌落形態(tài)、分生孢子梗和分生孢子與深綠木霉相似，其5.8SrDNA-ITS序列與編號為HQ229943的深綠木霉相似度達到100％，確定 H18-1-1和 TF28木霉菌株均為深綠木霉(Trichoderma atroviride)。
　　3、溫室

5、盆栽測定TF28和H18-1-1的防病效果及對小麥防御酶系的影響
　　利用溫室盆栽的方法測定TF28和H18-1-1兩個菌株的防病效果，結(jié)果表明：接種紋枯病菌21天后施入木霉H18-1-1的處理，對小麥紋枯病的防病效果為63.63%；接種紋枯病菌21天后施入木霉TF28的處理，對小麥紋枯病的防病效果為54.45%，表明木霉菌株H18-1-1和TF28能顯著降低小麥紋枯病的發(fā)病率。木霉對小麥葉片防御酶系影響的測定結(jié)果表明，H18-1

6、-1和TF28施入3天后均能使小麥葉片的超氧化物歧化酶、過氧化物酶、過氧化氫酶等防御酶活性提高。
　　4、沙培苗法測定木霉對小麥的促生效果評價
　　將小麥種子經(jīng)水培3天后長出的幼苗，在含有H18-1-1、TF28菌株孢子的懸浮液中進行沾根處理，轉(zhuǎn)入滅菌沙土的盆中培養(yǎng)35天，測定木霉孢子對小麥根系活力的影響，結(jié)果表明，經(jīng)H18-1-1、TF28菌株處理后的小麥植株，其根系活力明顯高于對照處理。5、田間試驗對不同木霉菌株的防病及

7、促生效果評價
　　選用H18-1-1、TF28、T10這3個菌株進行田間試驗生防效果的評價，分別于小麥分蘗初期、拔節(jié)初期、灌漿后期測定小麥的生長指標及對紋枯病的控制效果，結(jié)果表明：菌株H18-1-1在分蘗初期及拔節(jié)初期對小麥的株高、根數(shù)、鮮重、干重等生長指標表現(xiàn)出明顯的促生效果。以小麥拔節(jié)初期不同處理小麥紋枯病的發(fā)病率作為指標，評價不同菌株的防病效果，結(jié)果表明，H18-1-1處理對小麥紋枯病的防治效果為27.66%，T10和TF2