Ad-hTERTp-HSV-TK-GCV系統(tǒng)對肝癌腹水抑制效應實驗研究.pdf

1、目的：單純皰疹病毒胸苷激酶基因治療是一種應用最廣泛的基因治療策略，本研究探討由人端粒酶逆轉錄酶啟動子驅動單純皰疹病毒胸腺激酶基因的重組腺病毒聯(lián)合更昔洛韋對小鼠肝癌腹腔種植腹水生成的影響。
　　 方法：⑴將hTERT啟動子驅動單純皰疹病毒胸腺激酶基因的重組腺病毒進行擴增、純化及滴度測定；⑵將腹腔內接種H22細胞的小鼠隨機分為Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV組、Ad-hTERTp-HSV-TK組、GCV組和空白對照組，48h

2、后給與相應的治療，并觀察各組小鼠體重、腹圍、腹水量、生存時間，以及對體內臟器的影響；⑶流式細胞儀測定腹水腫瘤細胞凋亡百分率；⑷透射電鏡觀察腹水腫瘤細胞的形態(tài)學變化。
　　 結果：①將病毒液擴增、純化后，用50％組織培養(yǎng)感染劑量法(TCID50)測定病毒滴度為1.5×1010pfu/ml；②經過Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV治療的小鼠，顯示出明顯的腹水抑制作用，體重和腹圍增長緩慢，其腹水量顯著低于各對照組(P＜0.01)

3、，生存時間延長(P＜0.01)，并且對體內臟器無明顯毒副作用。③Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV組腹水腫瘤細胞凋亡率為(27.12±2.12)％，明顯高于其他各對照組(P＜0.01)。④電鏡下觀察Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV組的腹水腫瘤細胞呈凋亡改變。
　　 結論：Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV系統(tǒng)可通過誘導肝癌細胞凋亡而抑制小鼠腹水生成，并延長生存期，是一種安全可行的治療方法，對其臨床應用具有理論