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文檔簡介
1、目的:測定αB-晶狀體蛋白在體外培養(yǎng)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(retinal pigment epithelial cell,RPE)中的表達(dá),探討αB-晶狀體蛋白對(duì)體外培養(yǎng)人RPE細(xì)胞增殖的影響。
方法:傳代培養(yǎng)人ARPE-19細(xì)胞系,免疫熒光技術(shù)檢測αB-晶狀體蛋白在RPE細(xì)胞中的表達(dá)。用不同稀釋濃度(1/102、1/103、1/104、1/105、1/106:V/V)的αB-晶狀體蛋白以及其抗體干預(yù)相應(yīng)組細(xì)胞,MTT方法檢測
2、不同時(shí)間點(diǎn)各組細(xì)胞OD值,流式細(xì)胞技術(shù)檢測不同稀釋濃度(1/102、1/103、1/104、1/105、1/106:V/V)的αB-晶狀體蛋白以及其抗體干預(yù)相應(yīng)組組細(xì)胞不同時(shí)間點(diǎn)的周期及凋亡情況。
結(jié)果:αB-晶狀體蛋白在體外培養(yǎng)人RPE細(xì)胞胞漿中有表達(dá);在48h時(shí),濃度為1/104至1/102時(shí),三組細(xì)胞的吸光度值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);蛋白組與對(duì)照組相比自0h-48h間蛋白組的G1期比例減小,S、G2期比例增加,
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