細(xì)胞周期檢測點的調(diào)控：ATM及chk1-2反義基因治療白血病的研究.pdf

1、華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文細(xì)胞周期檢測點的調(diào)控：ATM及chk1/2反義基因治療白血病的研究姓名：湯屹申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：血液內(nèi)科指導(dǎo)教師：劉文勵2002.5.1竺! 型墊盔蘭旦疊墮蘭墮————————————壁蘭蘭! ! ! 鯊染率約為5 ％一2 5 ％之間，并在2 4 —7 2 小時之間存在轉(zhuǎn)染率的一個高峰和衰減的動態(tài)過程，3 6 小時為高峰期，7 2 小時轉(zhuǎn)染率有較大衰減，而且原代細(xì)胞較H L - - 6 0 細(xì)胞株更

2、難于轉(zhuǎn)染。2 ． 檢測了2 2 例白血病患者，其中包括急性髓性白血病( A M L ) 患者1 5 例( M 26 例，M 3 5 例，M 5 4 例) 、慢性粒細(xì)胞性白血病( C M L ) 患者7 例( 慢性期5 例，加速期1 例，急變期1 例) 和9 種腫瘤細(xì)胞株，發(fā)現(xiàn)在上述原代白血病細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞株中，A T M 基因的m R N A 的表達(dá)普遍存在降低和缺失現(xiàn)象。，，，結(jié)論：由于質(zhì)粒對原代白血病細(xì)胞的轉(zhuǎn)染率不太理想，而且轉(zhuǎn)染陽

3、性細(xì)胞維持時間不長，這將影響A T M 反義封閉的效果。另外，A T M 基因本身在某些白血病及其他腫瘤細(xì)胞中就有表達(dá)量的缺失和減低，因此，對于這些病例，反義封閉A T M 基因?qū)⑹招跷??？傊|(zhì)粒P z e o S V 2 ／A T MP 1 3 K 反義封閉A T M 基因治療原代白血病細(xì)胞的可行性有待進(jìn)一步商榷。第二章．腫瘤細(xì)胞對放射線照射及化療損傷后表現(xiàn)的細(xì)胞周期阻滯現(xiàn)象及其與A T M 表達(dá)量之間的關(guān)系，目的：了解非同步化的

4、正常人外周血單個核細(xì)胞及部分腫瘤細(xì)胞株對放射線和化防法結(jié)果：療藥所表現(xiàn)的細(xì)胞周期和凋亡的變化。同時觀察其與A T M 表達(dá)量的關(guān)系。以6 G y 、1 0G y 不同劑量的C o 一6 0 照射正常人外周血單個核細(xì)胞及白血病細(xì)胞株H L 一6 0 、K 5 6 2 ，宮頸癌細(xì)胞株S i H A ，子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株1 1 3 ，分別于6 h ，1 2 h ，2 4 h ，6 0 h 等時間點觀察其細(xì)胞周期和凋亡的變化。同時以R T - P

5、 C R 和流式細(xì)胞儀測量其A T M 的R N A 及蛋白的表達(dá)量，以觀察細(xì)胞周期和凋亡的變化與A T M 表達(dá)量之間的關(guān)系。S i H A 細(xì)胞株A T M 的R N A 表達(dá)量是H L ．6 0 細(xì)胞株的約8 倍，A T M 蛋白表達(dá)量為H L - 6 0 細(xì)胞株的2 倍，H L - - 6 0 的放射敏感性較S i H A 強(qiáng)?！?。b結(jié)論：1 ．S i H A 與H L - 6 0 放射敏感性與A T M 的表達(dá)量相關(guān)，A T