BSP在腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移中作用的初步研究.pdf

1、惡性腫瘤的"惡"之所在除增長(zhǎng)失控外,主要具有侵襲性和轉(zhuǎn)移性.腫瘤侵襲與轉(zhuǎn)移是腫瘤病人的主要致死因素,90%以上的腫瘤患者最終死于腫瘤轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā).因此,尋求一種靈敏、特異的診斷手段,對(duì)于轉(zhuǎn)移的早期診斷顯得尤為必要.骨唾液酸蛋白(bone sialoprotein,BSP)是存在于細(xì)胞外基質(zhì)中的一種高度磷酸化和糖基化的非膠原蛋白,主要表達(dá)于胚胎滋養(yǎng)層細(xì)胞和骨細(xì)胞.近年來(lái),BSP在骨轉(zhuǎn)移瘤中的高表達(dá)提示它在腫瘤的微鈣化和骨轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用.

2、然而,腫瘤細(xì)胞對(duì)骨的"親和性"機(jī)制還不甚清楚,本研究主要對(duì)BSP在腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用機(jī)制進(jìn)行探討.侵襲是轉(zhuǎn)移最關(guān)鍵的步驟.本文從增殖、粘附、降解和移動(dòng)等方面,研究了BSP對(duì)乳腺癌細(xì)胞MCF-7侵襲和轉(zhuǎn)移潛能的影響.將構(gòu)建的pCDNA 3.1(-)-BSP和pCDNA 3.1(-)-antiBSP穩(wěn)定轉(zhuǎn)染MCF-7細(xì)胞.RT-PCR確證轉(zhuǎn)染細(xì)胞中重組質(zhì)粒的存在后,細(xì)胞生長(zhǎng)曲線、軟瓊脂集落形成、平板集落形成實(shí)驗(yàn)及流式細(xì)胞術(shù)證實(shí)了BSP對(duì)細(xì)胞增

3、殖有一定的促進(jìn)作用;細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示BSP使MCF-7細(xì)胞粘附性增加,并且BSP的高表達(dá)使MCF-7細(xì)胞中E-cadherin表達(dá)下降;酶譜和RT-PCR證實(shí)轉(zhuǎn)染了BSP基因的MCF-7細(xì)胞中MMP2活性和表達(dá)量的升高,亦用酶譜檢測(cè)了uPA活性的增強(qiáng);Wound healing assay和Transwell migration assay提供了BSP促進(jìn)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)能力的依據(jù).結(jié)果表明,BSP在一定程度上促進(jìn)了腫瘤的轉(zhuǎn)移,進(jìn)一步的證據(jù)