重組人白細胞介素-2對慢性高眼壓模型大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)元保護作用的研究.pdf

1、目的 建立大鼠慢性高眼壓模型，探討慢性高眼壓對SD(Sprague-Dawley)大鼠視網(wǎng)膜形態(tài)及視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞(RGCL，retinal ganglion cells 1ayer)神經(jīng)元密度影響。探討重組人白細胞介素2(recombinant human interleukin-2,rhIL-2)對SD大鼠慢性高眼壓視神經(jīng)損傷的保護作用。 方法 采用532nm激光燒灼SD大鼠角鞏膜緣淺層靜脈，阻斷房水回流的方法建立大鼠慢性

2、高眼壓模型。用Tonopen眼壓計測量正常大鼠的眼壓。24只SD大鼠隨機分為正常對照組、安慰劑(生理鹽水)組、溴莫尼定(阿法根)治療對照組和rhIL-2治療組4組。正常對照組不作任何處理；其余3組建立慢性高眼壓模型,模型建立一周后，分別腹腔注射生理鹽水、溴莫尼定及rhIL-2。用TUNEL染色法檢測各組大鼠RGCs層神經(jīng)元的凋亡情況。用免疫組織化學染色法和圖象分析的方法檢測各組大鼠RGCs層神經(jīng)元表達Bc1-2抗原的變化。 結

3、果 正常SD大鼠白天眼壓界于7mmHg～20mmHg之間，平均眼壓值為12.62±0.28mmHg。532nm激光燒灼阻斷大鼠角鞏膜緣3/4周鞏膜淺層靜脈，模型制作后第一天右眼眼壓上升明顯，平均達63.67mmHg；造模后一周眼壓稍有下降，平均達58.75mmHg，4周之后趨于平穩(wěn)，維持在.40mmHg左右，HE染色可見大鼠右眼視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞數(shù)與其左眼比較，差異有統(tǒng)計學意義。慢性高眼壓組大鼠藥物干預后第4周,正常對照組大鼠RGCL神經(jīng)

4、元TUNEL染色陽性的平均光密度值(meanoptical density，NOD)最低(0.31±0.02))；慢性高眼壓模型組MOD顯著上升(p<0.01)，其中腹腔注射rhIL-2(0.50±0.04)及溴莫尼定(0.60±0.04)的大鼠MDO較安慰劑組(生理鹽水組)(0.80±0.16)低(p<0.01)，而腹腔注射rhIL-2的慢性高眼壓模型大鼠MOD與其他慢性高眼壓模型組相比為最低(p<0.01)。正常組大鼠RGCs層神經(jīng)

5、元對bc1-2抗原的表達較少(0.43±0.03)；慢性高眼壓模型中安慰劑組、溴莫尼定治療對照組及rhIL-2治療組RGCs層神經(jīng)元的胞漿或胞核上可見有陽性細胞表達；其中安慰劑組MOD(0.34±0.03)明顯小于溴莫尼定組(0.57±0.03)，而rhIL-2組(0.73±0.03)最高，(p<0.01)。 結論: 1.正常大鼠基礎眼壓為7～20mmHg，平均眼壓為12.62±0.28mmHg。 2．Tono

6、pen眼壓計能用于測量SD大鼠的眼壓。 3．采用532nm激光燒灼大鼠角鞏膜緣淺層鞏膜靜脈可成功建立穩(wěn)定的大鼠慢性高眼壓模型，具有持續(xù)時間長、建立方便、并發(fā)癥少的優(yōu)點。 4．光鏡下觀察HE染色的RGCL神經(jīng)元的密度變化可以評估大鼠慢性高眼壓模型RGCL神經(jīng)元的損傷程度。 5．rhIL-2能夠抑制慢性高眼壓RGCL神經(jīng)元的凋亡，起到保護RGCL神經(jīng)元的作用。 6．rhIL-2通過誘導RGCL神經(jīng)元的bcl-