特異性甲基化誘導(dǎo)劑SurKex抑制Survivin表達.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文以Survivin為肺癌分子靶標(biāo)，應(yīng)用DNA甲基化基因沉默技術(shù)設(shè)計寡核苷酸藥物SurKex，選擇性抑制NCI-H460細胞中survivin基因的表達，且特異性誘導(dǎo)了survivin啟動子的甲基化，再次驗證了DNA甲基化沉默基因的理論，且為表觀遺傳領(lǐng)域的研究提供了研究工具，也為腫瘤藥物的設(shè)計提供了新的思路。 首先，通過RT-PCR方法，驗證了survivin基因在NCI-H460細胞株中過量表達。 其次，將SurKe

2、x轉(zhuǎn)染NCI-H460細胞，并抽提RNA，通過半定量RT-PCR方法，初步確定Surkex對survivin mRNA的影響。結(jié)果顯示： Surkex抑制了survivin mRNA的表達，且濃度越高抑制越明顯，5uM比2.5uM濃度的Sukex抑制更明顯。 最后，將5uM濃度的Surkex轉(zhuǎn)染NCI-H460細胞，并抽基因組DNA，通過Bisulfite sequencing方法考察survivin啟動子位點的甲基化情況，實驗

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