姜黃素經(jīng)肝動(dòng)脈給藥抑制兔VX2肝移植瘤生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、原發(fā)性肝癌是世界上常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，50﹪以上發(fā)生在我國(guó)，位列我國(guó)癌癥患者死亡原因第二位。近20年來(lái)，治療方式由傳統(tǒng)手術(shù)為主導(dǎo)地位轉(zhuǎn)變成以手術(shù)和介入微創(chuàng)治療為主的綜合治療，其中TACE已被公認(rèn)為治療不能手術(shù)切除和術(shù)后復(fù)發(fā)肝癌的首選方法，但其總體療效尚不能令人滿意，其主要原因在于肝癌TACE術(shù)后復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移，影響患者遠(yuǎn)期生存率。 改進(jìn)藥物的組合，特別是應(yīng)用抗腫瘤生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移的新藥物，是提高TACE療效的方式之一。姜黃素(curcumi

2、n)是從一種常用中藥姜黃中提取的活性成分，主要含有3種主要成分：姜黃素Ⅰ(77﹪)，姜黃素Ⅱ(17﹪)，姜黃素Ⅲ(3﹪)，其化學(xué)分子式分別為C<,21>H<,20>O<,6>、C<,20>H<,18>O<,5>、C<,19>H<,16>O<,4>(見(jiàn)圖1)。許多體外實(shí)驗(yàn)表明，中藥姜黃素具有明顯抑制體外腫瘤生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移的作用，然而動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)報(bào)道較少。兔VX2肝移植瘤是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模擬TACE的經(jīng)典模型之一，本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用該模型將姜黃素制成碘混經(jīng)肝動(dòng)

3、脈給藥，發(fā)揮其雙重靶向作用，觀察其抑制肝癌生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移的作用，以期望能為肝癌開(kāi)辟新的治療方式，提高肝癌治療效果。 目的: 觀察姜黃素碘油乳劑經(jīng)肝動(dòng)脈給藥對(duì)兔VX2肝移植瘤生長(zhǎng)率、肝內(nèi)轉(zhuǎn)移、肺轉(zhuǎn)移、腹腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況，應(yīng)用熒光免疫組化定量分析MMP-2、MMP-9，探討其與轉(zhuǎn)移的相關(guān)性，初步評(píng)價(jià)姜黃素抑制腫瘤生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移的作用，為其在活體動(dòng)物肝癌模型中動(dòng)脈給藥的治療效果提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法: 45只新西蘭兔肝左葉種

4、植VX2瘤，分成對(duì)照組A和實(shí)驗(yàn)組B、C、D、E共5組，分別經(jīng)肝動(dòng)脈緩慢推注生理鹽水、超液態(tài)碘油、表阿霉素碘油乳劑、姜黃素碘油乳劑、姜黃素表阿霉素碘油乳劑，治療前及治療后2周行CT掃描，部分行DSA造影檢查，觀察腫瘤的生長(zhǎng)情況；治療后2周，觀察肝內(nèi)、雙肺及腹腔淋巴結(jié)等轉(zhuǎn)移情況，并計(jì)數(shù)，測(cè)量轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)直徑，按直徑大小分類(lèi)；同時(shí)處死各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，采集標(biāo)本，用4﹪中性福爾馬林固定，常規(guī)石臘包埋，應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法定量檢測(cè)MMP-2、9。

5、 結(jié)果: 1.45只大白兔成功種植肝移植瘤42只，肝移植瘤種植成功率為93.3﹪，CT平掃部分為類(lèi)圓形低密度腫塊影；42只兔模型肝動(dòng)脈穿刺成功40只，穿刺成功率95.2﹪，肝動(dòng)脈造影表現(xiàn)為肝動(dòng)脈增粗、腫瘤供血血管呈抱球征，實(shí)質(zhì)期可見(jiàn)腫塊濃密染色，推注碘混后，沉積碘油可顯示腫塊輪廓。 2.A組腫塊長(zhǎng)徑平均約為3.5cm，B、C、D、E各組長(zhǎng)徑均約為2.5cm，B、C、D、E組腫瘤生長(zhǎng)率差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.98)，A組

6、與B、C、D、E各組腫瘤生長(zhǎng)率差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均小于0.001)。 3.各組實(shí)驗(yàn)兔肝內(nèi)轉(zhuǎn)移發(fā)生率均在50﹪左右，轉(zhuǎn)移數(shù)目少，轉(zhuǎn)移灶直徑亦小，A、B、C、D、E五組兔肝內(nèi)轉(zhuǎn)移發(fā)生率差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.99)。 4.A、B、C三組在肺轉(zhuǎn)移總數(shù)目、結(jié)節(jié)直徑<3mm數(shù)目、>3mm數(shù)目差別均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值分別為0.95、0.92、0.89)；D、E二組在肺轉(zhuǎn)移總數(shù)目、結(jié)節(jié)直徑<3mm數(shù)目、>3mm數(shù)目差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)

7、意義，且分別與A、B、C三組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均小于0.05)；各組在肺轉(zhuǎn)移總數(shù)目分別與MMP-2、MMP-9陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)強(qiáng)度成正相關(guān)；A、B、C三組MMP-2、MMP-9陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)強(qiáng)度差別均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均大于0.10)；D、E兩組MMP-2、MMP-9陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)強(qiáng)度差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均小于0.01)，A、B、C三組分別與D、E兩組在MMP-2、MMP-9陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)強(qiáng)度差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均小于0.01)。 5．腹

8、腔淋巴結(jié)廣泛轉(zhuǎn)移，D、E兩組腹腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移明顯少于A、B、C三組，各組腹腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)均與MMP-2、MMP-9陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)強(qiáng)度成正相關(guān)。 結(jié)論: 1．采用瘤塊包埋法建立兔VX2肝移植瘤模型方法簡(jiǎn)便、成功率高；開(kāi)腹直視下穿刺肝動(dòng)脈給藥可行性高。 2．給藥2周后，碘油栓塞明顯抑制兔VX2肝移植瘤的生長(zhǎng)，未觀察到姜黃素、表阿霉素加強(qiáng)腫瘤生長(zhǎng)抑制的作用。 3．兔VX2肝移植瘤模型廣泛轉(zhuǎn)移，以肺、腹腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為主