經(jīng)動(dòng)脈灌注β-欖香烯對(duì)VX2肝癌移植荷瘤兔腫瘤血管生成的影響.pdf

1、目的：選擇性經(jīng)肝動(dòng)脈灌注化療栓塞術(shù)(transcatheter hepaticarterialchem oem bolization TACE)是肝癌治療的一項(xiàng)重要方法，如何更好的提高TACE 的療效，減少其治療后的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，一直是肝癌研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)是腫瘤組織中最重要的血管生成因子，不僅與腫瘤血管發(fā)生、增殖有關(guān)，而且直接參與其浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。另外，微血管密度(microvessel density MVD

2、)水平也是影響患者術(shù)后存活的重要預(yù)后因素(P=0.001 2)；許多實(shí)驗(yàn)已經(jīng)表明，VEGF與MVD之間存在正相關(guān)關(guān)系。目前認(rèn)為腫瘤的增殖和轉(zhuǎn)移依賴于血管新生。所以，TACE術(shù)后VEGF及MVD的變化直接影響了TACE的治療效果。目前，中藥抗血管生成的研究已成為當(dāng)前中藥研究的熱點(diǎn)，特別是通過(guò)抗血管生成治療腫瘤的研究尤為突出。β-欖香烯(elemene)是從中藥溫莪術(shù)根莖中提取出來(lái)的一種抗腫瘤藥物，具有很強(qiáng)殺滅腫瘤細(xì)胞及抑制腫瘤生長(zhǎng)作用2。

3、本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)兔Vx2肝癌模型經(jīng)動(dòng)脈灌注β-欖香烯來(lái)進(jìn)一步探討β-欖香烯在介入治療經(jīng)動(dòng)脈給藥途徑下的抗腫瘤血管生成的療效。 方法：建立兔VX2肝癌移植模型，將動(dòng)物隨機(jī)分為對(duì)照組：A組(6只生理鹽水2ml 10min)；治療組：B組(7只碘油單純栓塞0.5ml10min)，C組(7只β-欖香烯沖擊灌注50mglomin)，D組(7只β-欖香烯持續(xù)灌注50mg5hmur)，E組(7只碘油0.5m1+β-欖香烯50mg栓塞灌注10mi

4、n)5組。經(jīng)股動(dòng)脈插管，導(dǎo)管頭置于兔肝固有動(dòng)脈，分別按不同分組給予栓塞灌注治療。實(shí)驗(yàn)兔死亡后解剖取肝臟及肝內(nèi)腫瘤進(jìn)行免疫組化檢測(cè)量各組VEGF及MVD的表達(dá)。VEGF(血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子)以鏈霉素抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶(SP)法檢測(cè)其表達(dá)，免疫組化染色按試劑盒說(shuō)明進(jìn)行。采用半定量計(jì)數(shù)方法統(tǒng)計(jì)結(jié)果；微血管密度(microvessel density MVD)采用CD31單克隆抗體稀釋度1∶50染色，在低低倍鏡(40x)下觀察每例切片中3個(gè)

5、血管密度最高區(qū)即所謂血管熱點(diǎn)區(qū)，再在400x視野下計(jì)數(shù)3個(gè)視野被染呈棕色的血管數(shù)，取其平均值為MVD值；對(duì)各組VEGF及MvD數(shù)值采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，P<0.05差異有顯著性意義。結(jié)果：鏡下觀察顯示VEGF陽(yáng)性細(xì)胞為胞漿或胞膜均勻的棕黃染色。腫瘤組織的血管內(nèi)皮細(xì)胞為棕黃染色，瘤灶內(nèi)微血管染色部位主要出現(xiàn)在鄰近壞死組織的邊緣和腫瘤的邊緣。單純應(yīng)用碘油栓塞組的MVD對(duì)比其他各組均有明顯升高，并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。而β-欖香烯持續(xù)灌

6、注、灌注組MVD值略有減低，但無(wú)顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；碘油加β-欖香烯組MVD略有升高，但這種些許差異與A、C、D組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。單純的碘油栓塞組vEGF值有明顯升高；β-欖香烯持續(xù)灌注、灌注組及碘油加β-欖香烯組的VEGF表達(dá)分?jǐn)?shù)較鹽水對(duì)照組有增加，經(jīng)分析均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 結(jié)論：β-欖香烯與碘油栓塞聯(lián)合應(yīng)用可以有效的減少腫瘤血供，并避免新生腫瘤血管形成，從而減少 TACE術(shù)后轉(zhuǎn)移及腫瘤復(fù)發(fā)的發(fā)生，提高介入治療