改良法兔VX2肝移植瘤模型建立及綜合治療的實驗研究.pdf

1、肝癌是我國最常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率居第三位。早期肝癌最有效的治療方法是手術(shù)切除。但由于其發(fā)病隱匿、就診較晚及合并肝硬化致肝功能差等原因，手術(shù)切除率僅20％～30％。對不能手術(shù)切除的中晚期肝癌患者采用微創(chuàng)治療，仍可取得較好療效。隨著現(xiàn)代物理學(xué)技術(shù)向醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的延伸以及現(xiàn)代影像技術(shù)、微電子學(xué)、計算機信息處理等在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用，微創(chuàng)治療已成為中晚期肝癌治療中不可缺少的重要組成部分。肝癌常用的微創(chuàng)治療可以分成兩大類：一類是血管內(nèi)微創(chuàng)治療，包括

2、肝動脈灌注化療(transcatheter arterialinfusion，TAI)、肝動脈栓塞(transcatheter arterial embolization，TAE)和肝動脈化療栓塞(transcatheter arterial chemoembolization，TACE)；另一類是非血管性微創(chuàng)治療，包括經(jīng)皮化學(xué)消融和經(jīng)皮物理消融，前者常用的有經(jīng)皮穿刺無水乙醇注射(percutaneous ethanol injecti

3、on therapy，PEI)、經(jīng)皮穿刺乙酸注射(percutaneousacetic acid injection therapy，PAI)，后者包括經(jīng)皮穿刺微波凝固(percutaneousmicrowave coagulation therapy，PMCT)、經(jīng)皮穿刺靶向氬氦刀冷凍消融(percutaneous targeted argon-helium cryoablation，PAHCA)、經(jīng)皮穿刺射頻消融(percutane

4、ous radio-frequency ablation，RFA)、經(jīng)皮穿刺激光間質(zhì)熱療(percutaneous laser-induced thermo therapy，LITT)及高強度聚焦超聲(high-intensity focused ultrasound，HIFU)等。其中微波凝固、氬氦刀冷凍消融和射頻消融在臨床上被廣泛應(yīng)用。這三種微創(chuàng)治療都屬于經(jīng)皮物理消融技術(shù)，即采用冷或熱效應(yīng)來殺滅腫瘤細(xì)胞，達到“一次性損毀”的治療效果

5、。所謂“一次性損毀”是指使用該項技術(shù)治療肝癌時能一次性毀滅、殺死其治療范圍內(nèi)的腫瘤細(xì)胞。各種微創(chuàng)技術(shù)治療肝癌各有其優(yōu)缺點，臨床療效各有千秋。TACE聯(lián)合PMCT治療肝癌的效果目前國內(nèi)外尚無相關(guān)實驗對比研究的報道。兔VX2肝癌模型是少數(shù)建立在大動物身上的肝癌模型，比較適合于肝癌的微創(chuàng)治療實驗研究。其瘤源VX2腫瘤細(xì)胞株起源于Shope病毒誘發(fā)的兔乳頭狀瘤衍生的鱗癌，經(jīng)過72次移植傳代后正式建立株，命名為VX2，是目前最為理想的肝癌實驗?zāi)Ｐ?/p>

6、之一，被廣泛應(yīng)用于肝癌腫瘤學(xué)、腫瘤治療學(xué)、放射生物學(xué)、抗癌藥物藥代動力學(xué)及腫瘤影像學(xué)等實驗研究。本實驗研究的目的在于采用數(shù)字減影血管造影(digitalsubtraction angiography，DSA)設(shè)備導(dǎo)引下使用Angiotech SKATER穿刺針經(jīng)皮穿刺接種瘤組織塊于肝臟制作兔。VX2肝移植瘤模型，并使用經(jīng)動脈化療栓塞、微波凝固和經(jīng)動脈化療栓塞+微波凝固三種微創(chuàng)治療技術(shù)進行分組治療，通過對比各組CT測量腫瘤體積、外周血CD

7、3+、CD4+細(xì)胞分布、腫瘤組織壞死率比較各自的治療效果，為臨床上正確地選擇肝癌綜合治療技術(shù)提供理論依據(jù)和實驗依據(jù)。本研究分為兩個部分：
　　 第一部分：改良法兔VX2肝移植瘤模型的建立。
　　 目的：探討DSA設(shè)備導(dǎo)引下經(jīng)皮穿刺瘤組織塊接種法制作兔VX2肝移植瘤模型的可行性
　　 方法：新西蘭大白兔50只，DSA設(shè)備導(dǎo)引下采用Angiotech SKATER穿刺針經(jīng)皮穿刺接種瘤組織塊于肝臟，14天后行CT平掃評

8、價腫瘤接種成功率，測量腫瘤體積并隨機處死10只實驗兔進行病理分析。
　　 結(jié)果：DSA設(shè)備導(dǎo)引下經(jīng)皮穿刺瘤組織塊接種法制作兔VX2肝移植瘤模型成功率為100％。
　　 結(jié)論：⑴采用Angiotech SKATER穿刺針經(jīng)皮穿刺瘤組織塊接種法建立兔VX2肝移植瘤模型具有方法簡單、成功率高、動物損傷小等特點，能為肝癌臨床治療研究提供成熟的大型實驗動物模型。⑵兔VX2肝移植瘤為富血管性腫瘤，其供血動脈主要為肝動脈，類似于人類原

9、發(fā)性肝癌。病理學(xué)上腫瘤為巨塊型實體瘤、侵潤性生長，血供豐富，類似于巨塊型肝癌。⑶應(yīng)用DSA作為穿刺導(dǎo)向設(shè)備，尤其是應(yīng)用C臂CT的特殊功能，可使穿刺定位更加準(zhǔn)確，造模成功率高，表明該方法安全可靠
　　 第二部分：經(jīng)導(dǎo)管肝動脈化療栓塞、經(jīng)皮微波凝固、經(jīng)導(dǎo)管肝動脈化療栓塞+經(jīng)皮微波凝固對兔VX2肝移植瘤治療效果對比研究。
　　 目的：對比TACE、PMCT、TACE+PMCT三種方法治療兔VX2肝移植瘤的效果。
　　

10、方法：取制作成功的肝移植瘤模型30只，隨機分為TACE組(A組)、PMCT組(B組)和TACE+PMCT組(C組)，每組10只，治療后第14天對比各組CT測量腫瘤體積、外周血CD3+、CD4+細(xì)胞分布、腫瘤組織壞死率。
　　 結(jié)果：治療后14天，C組的腫瘤體積為(0.624±0.031)cm3，明顯小于A組(0.799±0.057)cm3和B組(0.858±0.112)cm3，(P<0.05)；C組外周血CD3+細(xì)胞百分?jǐn)?shù)為(6

11、6.30±1.36)％，明顯高于A組(53.34±2.12)％和B組(60.68±1.06)％，(P<0.05)；C組外周血CD4+細(xì)胞百分?jǐn)?shù)為(48.19±1.43)％，也明顯高于A組(40.21±1.07)％和B組(44.03±0.08)％，(P<0.05)；C組腫瘤組織壞死率明顯高于A組和B組，(P<0.05)。
　　 結(jié)論：⑴TACE、PMCT均可使兔VX2腫瘤產(chǎn)生治療效果，但單獨使用兩種治療后腫瘤仍有殘余生存。TACE