抑郁癥免疫失衡機(jī)制中多巴胺受體D3與調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的關(guān)聯(lián)作用.pdf

1、[目的] 1．通過檢測抑郁癥中細(xì)胞因子IL-2、IL-10、TGF-β1及CD4<'+>CD25<'+>Treg數(shù)量和及其特征性標(biāo)志Foxp3的變化，探討抑郁癥的免疫失衡及Foxp3的作用。 2．以Foxp3為切入點，研究抑郁癥中多巴胺受體D3的表達(dá)變化與CD4<'+>CD25<'+>Treg之間的關(guān)聯(lián)作用，從而揭示抑郁癥中免疫失衡的可能機(jī)制。 [方法] 1．研究對象為2006年8月-2007年4月湘雅醫(yī)

2、院門診和住院的初診抑郁癥患者27例，未經(jīng)過抗抑郁藥物治療，符合中國精神障礙分類與診斷標(biāo)準(zhǔn)(CCMD-3)中及美國精神疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)(DSM-IV)抑郁癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)，17項漢密爾頓抑郁量表(HAMD)評分均≥24分。正常對照組選擇中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院學(xué)生和體檢中心健康人27例，保證各組年齡、性別、應(yīng)激因素方面差異無統(tǒng)計學(xué)意義。所有受試者在早晨06：00～09：00空腹時無菌采集取肘靜脈血。 2．應(yīng)用高效液相色譜測血清多巴胺濃度。

3、 3．應(yīng)用ELISA法測血清細(xì)胞因子IL-2、IL-10、TGF-β1濃度。 4．采用RT-PCR技術(shù)檢測外周淋巴細(xì)胞上多巴胺受體D3及Foxp3mRNA表達(dá)水平。 5．用免疫磁珠進(jìn)行分選得到CD4<'+>CD25<'+>Treg，計算其在外周血淋巴細(xì)胞中的比例。 6．用間接免疫熒光法同時標(biāo)記CD4<'+>CD25<'+>Treg上的D3和Foxp3，在激光共聚焦顯微鏡下觀察各組細(xì)胞的D3受體和Foxp3的共表

4、達(dá)情況。 7．統(tǒng)計分析：各組計量資料數(shù)值用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±S)表示，用SPSS12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，兩個獨(dú)立樣本均數(shù)間的比較用成組t檢驗，雙變量正態(tài)分布的兩變量間的相關(guān)性分析用person相關(guān)分析，以P值<0.05為差異有顯著性。 [結(jié)果] 1．血清中IL-2的濃度，抑郁癥患者組(103.2517±10.23)pg/mL較健康對照組(78.235±9.562)pg/mL升高(P<0.05)；IL-10的濃

5、度，抑郁癥患者組為(6.765±0.611)pg/mL，健康對照組為(9.593±0.921)pg/mL，兩組間有顯著性差異(P<0.01)；血清中TGF-β1的濃度，抑郁癥患者組為(20.981±3.98)ng/mL，健康對照組為(14.042±2.170)ng/mL，有顯著性差異(P<0.01)。 2．抑郁癥患者組血清多巴胺濃度為(0.01733±0.09530)ug/ml，較健康對照組(0.04939±0.01065)ug

6、/ml，差異具有非常顯著性(P<0.01)。 3．抑郁癥患者外周血CD4<'+>CD25<'+>Treg在外周CD4<'+>T細(xì)胞中的比例為(4.058±0.636)﹪，較健康對照組(5.406±0.6324)﹪下降，有顯著性差異(P<0.05)。 4．外周淋巴細(xì)胞上Foxp3 mRNA的表達(dá)，抑郁癥患者組較健康對照組明顯下降(P<0.01)，多巴胺受體D3 mRNA的表達(dá)，抑郁癥患者組較健康對照組明顯下降(P<0.01

7、)。 5．共聚焦熒光顯微鏡下可見CD4<'+>CD25<'+>Treg上Foxp3和多巴胺受體D3共表達(dá)，兩者的熒光強(qiáng)度在抑郁癥患者組均減弱。 6．外周淋巴細(xì)胞上Foxp3 mRNA的表達(dá)與D3 mRNA的表達(dá)正相關(guān)(r=0.533，P<0.01)；血清多巴胺濃度與外周淋巴細(xì)胞上Foxp3 mRNA的表達(dá)正相關(guān)(r=0.522，P<0.01)。 7．血清中TGF-β1濃度與CD4<'+>CD25<'+>Treg在

8、外周淋巴細(xì)胞中的比例正相關(guān)(r=0.603，P<0.01)，與Foxp3 mRNA的表達(dá)正相關(guān)(r=0.788，P<0.01)；血清中IL-10濃度與CD4<'4>CD25<'+>Treg在外周CD4<'+>T細(xì)胞中的比例亦正相關(guān)(r=0.316，P<0.05)與Foxp3 mRNA的表達(dá)正相關(guān)(r=0.254，P<0.05)。 [結(jié)論] 1.抑郁癥中存在免疫激活的現(xiàn)象，F(xiàn)oxp3的表達(dá)在此過程中有著重要作用。