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文檔簡介
1、1.研究背景及目的:
近30年來,自體脂肪移植已廣泛應用于整形美容外科,其已成為進行軟組織充填的重要方法,但單純的自體脂肪移植吸收率高、存活率低,從而限制了其進一步的推廣應用。本實驗將脂肪來源干細胞分別與脂肪顆粒、透明質酸鈉、Ⅰ型無菌膠原以適當比例混合,從而構建脂肪干細胞-生物支架復合物。將其注射于裸鼠皮下軟組織,探討其對裸鼠皮下軟組織血管化的影響,為脂肪干細胞移植及相關生物支架的篩選提供依據,為臨床應用提供理論基礎。
2、 2.方法:
將脂肪組織用膠原酶消化法進行分離,并收集原代脂肪干細胞,按照4×105個/ml密度置于低糖DMEM培養(yǎng)液傳代,收集所培養(yǎng)的第3代脂肪干細胞作為種子細胞。將種子細胞接種并完全貼壁后向普通培養(yǎng)液中加入誘導劑(10-6mmol/L地塞米松、10mg/L胰島素、0.5mmol/L/L3-異丁基-1-甲基黃嘌呤和0.2mmol/L吲哚美辛)培養(yǎng)2周。
將本實驗分為五組:A組(脂肪干細胞復合脂肪顆粒),B組(脂肪
3、干細胞復合透明質酸鈉),C組(脂肪干細胞復合Ⅰ型無菌膠原),D組為單純脂肪干細胞組,E組為單純脂肪顆粒組,在裸鼠皮膚上標記五個點,將五組試劑分別于標記點下注射到裸鼠皮下。3個月后將動物處死,完整取出移植物,并進行相關檢測和分析。
3.結果:
3.1、大體觀察取材時,裸鼠背部注射部皮下有一團狀組織塊,呈淡黃色,質軟,界限清晰,包膜完整,易分離,脂肪組織形狀不規(guī)則,大小不一。
3.2.微血管密度A、B、C組明顯
4、高于D組、E組,且差異有統(tǒng)計學意義(<0.01);D組明顯高于E組,且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01);A、B、C組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
3.3.存活率比較(%)A、B、C組明顯高于D組、E組,且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01);D組明顯高于E組,且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01);A、B、C組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
3.4.濕重測定A、B、C組明顯高于D組、E組,且差異有統(tǒng)計學意義(P<0
5、.01);E組與D組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);A、B、C組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
4.結論:
1.脂肪干細胞免疫原性較低,局部注射不會產生致熱反應及炎癥反應;2.ADSCs具有促血管化作用;3.脂肪組織、透明質酸鈉、Ⅰ型膠原可加速ADSCs的促血管化作用,且三種生物支架無顯著差異;4.ADSCs和生物支架具有一定的協(xié)同作用;5.脂肪干細胞復合相關生物支架做為可注射性材料具有一定的可行性,希望為整形
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