脂肪基質(zhì)血管成分促進(jìn)隨意皮瓣血管化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景：皮瓣是整形外科手術(shù)中的一項(xiàng)基本技術(shù)，常用來(lái)修復(fù)因創(chuàng)傷、腫瘤等引起的組織缺損。皮瓣遠(yuǎn)端的缺血壞死仍是困擾臨床醫(yī)生的難題。如果能在術(shù)前實(shí)現(xiàn)皮瓣的血管化，則有望大大降低其壞死率。
　　 目的：本課題將脂肪中的基質(zhì)血管成分應(yīng)用于隨意皮瓣的缺血治療中，觀察其是否可以有效的提高皮瓣的血管化，從而提高皮瓣成活率，為其臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)支持。
　　 方法：⑴以膠原酶消化脂肪得到基質(zhì)血管成分；利用密度梯度離心法分離骨髓中的單個(gè)核細(xì)胞。

2、DiI標(biāo)記后，以5×107的濃度重懸于1mlPBS中待移植。⑵于大鼠背部設(shè)計(jì)一10cm×3cm大小的矩形皮瓣，將基質(zhì)血管成分和骨髓中的單個(gè)核細(xì)胞移植至皮瓣的皮下組織層，PBS移植作為對(duì)照組。2天后，皮瓣掀開(kāi)原位縫合。⑶術(shù)后7天進(jìn)行下列檢測(cè)：統(tǒng)計(jì)皮瓣的成活面積，激光血流灌注成像儀監(jiān)測(cè)皮瓣的血流；取各組皮瓣相同部位的組織，固定包埋后行HE染色，統(tǒng)計(jì)10個(gè)100×視野下毛細(xì)血管的數(shù)量，求其平均密度；冰凍切片后，熒光顯微鏡觀察移植的SVF是否成

3、活。連續(xù)切片行HE染色，觀察移植的SVF是否出現(xiàn)于血管結(jié)構(gòu)中；用ELISA試劑盒檢測(cè)各組皮瓣組織中內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（VEGF）、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）蛋白的表達(dá)量。
　　 結(jié)果：①SVF組和BM-MNCs組皮瓣的成活面積（分別為72.2±2.0％、
　　 76.4±3.1％）明顯大于對(duì)照組（56.8 4.6％），P<0.05。SVF組和BM-MNCs組皮瓣的血流灌注強(qiáng)度和范圍明顯高于對(duì)照組。②SVF組和BM-