穴位注射脂肪來源基質(zhì)血管成分結(jié)合針刺足三里抗皮膚老化的實驗研究.pdf

1、目的：
　　探討穴位注射脂肪來源基質(zhì)血管成分(SVF)聯(lián)合針刺足三里穴位抗皮膚老化作用及其作用機制。
　　方法：
　　采用Ⅰ型膠原酶溶液及紅細胞裂解液制備SVF細胞懸液，染色后采用倒置顯微鏡測定SVF存活率，采用血球計數(shù)板細胞計數(shù)法進行SVF計數(shù)。24只18月齡SD大鼠隨機分為四組A組、B組、C組和D組。A組大鼠足三里穴位單次注射PBS，B組大鼠針刺足三里穴位10日，C組大鼠足三里穴位單次注射SVF細胞懸液，D組大鼠足

2、三里穴位注射SVF細胞懸液后針刺10日。各組大鼠治療10日脫椎處死后取得各組皮膚組織。各組大鼠脫臼處死后分別取背部部分皮膚組織，勻漿后分別采用黃嘌呤氧化酶法、二甲氨基苯甲醛法、硫代巴比妥酸法和ELISA法測定皮膚組織SOD活性、羥脯氨酸、丙二醛含量和透明質(zhì)酸水平。各組大鼠取其余皮膚組織常規(guī)石蠟切片，HE染色后比較各組大鼠皮膚厚度;采用兔抗人八因子相關(guān)抗原（Ⅷ-R Ag）多克隆抗體(1∶100)行免疫組化染色后比較各組大鼠皮膚血管化程度。

3、
　　結(jié)果：
　　(1)B組和C組大鼠皮膚組織SOD活性、羥脯氨酸和透明質(zhì)酸含量均較A組大鼠顯著升高（P＜0.05)，B組和C組大鼠皮膚組織丙二醛含量較A組大鼠顯著降低（P＜0.05);D組大鼠皮膚SOD活性、羥脯氨酸和透明質(zhì)酸含量并且較B組和C組大鼠顯著增加（P＜0.05)，D組大鼠皮膚丙二醛含量較B組和C組大鼠顯著降低（P＜0.05)。
　　(2)B組和C組大鼠皮膚厚度和血管化程度較A組大鼠顯著增加（P＜0.05)