脂肪來源干細胞促血管化機制及膀胱缺損修復的實驗研究.pdf

1、目的：研究低氧誘導(hypoxia precondition)人脂肪來源干細胞（human adipose-derived stem cells，ASCs）促血管化的相關機制；研究膀胱粘膜下層脫細胞基質/絲素蛋白(bladder acellular matrix grafts/silk fibroin，BAMG-SF）體內修復膀胱缺損的實驗研究，包括：BAMG-SF雙層支架材料的生物相容性研究；研究 BAMG-SF雙層材料修復大面積膀胱

2、缺損的動物實驗；對比研究BAMG和BAMG-SF修復膀胱缺損的差異。
　　方法：①首先通過不同氧濃度和不同時間預置處理，對比相關基因的表達，確定最佳低氧預置濃度和時間；通過體內成管實驗和體外血管形成實驗探討血管化機制。②制備雙層BAMG-SF支架,接種人脂肪來源干細胞（ASCs），體內外培養(yǎng)后，觀察細胞支架復合情況。③取SD大鼠24只，隨機分成兩組，膀胱切開術組（對照組）6只，BAMG-SF組（實驗組）18只。分別行膀胱切開術和膀

3、胱擴大術。術后2周、4周、12周檢測膀胱再生情況。④取SD大鼠24只，隨機分成三組，膀胱切開術組（對照組）8只，BAMG組（實驗組1）8只，BAMG-SF組（實驗組2）8只。對照組行膀胱切開術，實驗組行膀胱擴大術。術后12周檢測并對比各組膀胱組織再生情況。
　　結果：①低氧預處理的策略是采用<0.1％ O2預置24小時，發(fā)現在ASCs中 SDF-1a/CXCR4與血管化密切相關。②ASCs在體內外能覆蓋BAMG-SF表面并長入支架

4、內部，細胞材料復合良好。③隨著BAMG-SF修復時間的延長，膀胱尿路上皮、平滑肌、血管的再生逐漸增多，到12周時達到膀胱切開術相同水平，而神經修復的效果較差。④在12周時，BAMG-SF組在平滑肌、血管、神經再生方面均優(yōu)于BAMG組。
　　結論：ASCs經低氧預置后促進了其促血管生成因子的分泌，增強了體外成管和體內新生血管的形成，且通過VEGF-A和SDF-1a/CXCR4信號通路起作用；BAMG-SF雙層支架生物相容性好，適合A