FTY720聯(lián)合CsA在人卵巢組織家兔背肌移植模型中的遠期療效探究.pdf

1、背景：
　　 隨著現(xiàn)代腫瘤治療方案的進展，腫瘤病人的生存率大大提高。卵巢組織對化療、放療損傷很敏感，可引起卵巢內(nèi)分泌功能及生育能力的喪失。值得注意的是，有越來越多的女性推遲她們的生育年齡至30到40歲。年輕女性腫瘤患者的長期存活以及首次生育年齡的推遲迫使她們不得不面對卵巢早衰和不育的風(fēng)險。卵巢組織的異種移植是當前保留生殖能力的重要途徑。國內(nèi)外多數(shù)研究將鼠模型作為人卵巢組織異種移植最佳受體，效果值得肯定的同時我們看到它有種屬親緣性

2、遠，受體較難管理，移植物生長空間局限等不足之處。尚未有研究報道人卵巢組織家兔背肌內(nèi)移植模型.選擇家兔作為異種移植模型受體可以豐富現(xiàn)有移植模型，為搶救性保護年輕女性患者生殖能力提供更多選擇余地。
　　 目的：
　　 探討人新鮮人卵巢組織家兔背肌內(nèi)移植效果，評估聯(lián)合應(yīng)用FTY720和CsA對此模型遠期療效觀察。
　　 方法：
　　 選擇20只新西蘭大耳雌兔作為人卵巢組織異種移植的受體。經(jīng)去勢處理后的20只雌兔

3、隨機分配到7組中(其中空白組2只)。新鮮人卵巢組織異種移植到家兔背肌內(nèi)，所有移植物及相關(guān)淋巴器官于移植后8周全部回收。采用放免技術(shù)檢測外周血E2水平；用酶聯(lián)免疫法檢測血清IFN-Γ和IL-4水平；流式細胞檢測外周全血細胞CD4+/CD8+T淋巴細胞比例；回收后移植物HE染色觀察形態(tài)；移植物內(nèi)新生血管生成情況及卵泡生長情況分別用CD31和Ki-67進行免疫組化方法(EnVision二步法)檢測；淋巴器官圓小囊、胭窩淋巴結(jié)、脾臟、胸腺組織用

4、TLR-2/TLR-4進行免疫組化定位。
　　 結(jié)果：
　　 1.聯(lián)合用藥組中人卵巢組織背肌內(nèi)移植后的家兔能夠恢復(fù)正常的發(fā)情周期；
　　 2.較之單獨應(yīng)用空白組、CsA組和FTY720組，聯(lián)合用藥組明顯保護了家兔背肌內(nèi)的移植物，延長了卵巢組織的生存時間，明顯降低了外周血中CD4+/CD8+T淋巴細胞比例；
　　 3.聯(lián)合用藥組移植物靠近肌肉組織的外周部分有CD31+陽性染色的新生血管數(shù)明顯多于空白組和Cs

5、A組；聯(lián)合用藥組移植物內(nèi)低級別卵泡上的顆粒細胞以及卵巢基質(zhì)細胞有Ki-67陽性染色，空白組和CsA組內(nèi)僅卵巢基質(zhì)細胞有Ki-67弱陽性染色。
　　 4.TLR-2+/TLR-4+T淋巴細胞主要分布于胭窩淋巴結(jié)內(nèi)和脾臟動脈鞘周圍。較之空白組和CsA組，聯(lián)合用藥組和FTY720組的胭窩淋巴結(jié)內(nèi)和脾臟動脈鞘周圍TLR-2+/TLR-4+T淋巴細胞聚集明顯增加。
　　 結(jié)論：
　　 1.我們應(yīng)用FTY720聯(lián)合CsA建立