FTY720對蛋白負(fù)荷腎病模型大鼠腎小管間質(zhì)炎癥反應(yīng)的影響及機(jī)制探討.pdf

1、目的：腎小管間質(zhì)炎癥(TII)是慢性腎臟疾病導(dǎo)致腎間質(zhì)纖維化(TIF)形成的關(guān)鍵因素。蛋白尿作為一種重要的腎臟毒素，在促發(fā)小管間質(zhì)炎癥和纖維化過程中有著重要影響。本研究通過構(gòu)建蛋白負(fù)荷腎病大鼠模型，觀察FTY720這一新型免疫抑制劑對蛋白負(fù)荷腎病大鼠腎小管間質(zhì)炎癥反應(yīng)的作用，為臨床防治腎小管間質(zhì)炎癥和纖維化發(fā)生提供新的治療靶點(diǎn)。
　　方法： SPF級雄性Wistar大鼠經(jīng)右側(cè)腎切除且適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，隨機(jī)分為三組。生理鹽水對照組（

2、8只）:經(jīng)大鼠腹腔注射與BSA等體積的生理鹽水;蛋白負(fù)荷腎病模型(AO)組（10只）:經(jīng)大鼠腹腔注射牛血清白蛋白(BSA，5g/kg/d); FTY720干預(yù)組（10只）:經(jīng)大鼠腹腔注射BSA(5g/kg/d)的同時給予大鼠灌胃FTY720(0.5mg/kg/d)。留取第0、2、5、7、9周各組大鼠24h尿液;于實(shí)驗(yàn)第9周，處死各組大鼠并留取血、腎組織標(biāo)本，血常規(guī)檢測各組大鼠外周血標(biāo)本中炎癥細(xì)胞的變化情況，免疫組化檢測腎間質(zhì)中炎癥細(xì)胞的

3、分類情況，Western blot及Real-time PCR觀察各組大鼠腎臟組織中炎癥因子及Sphk1信號通路相關(guān)因子的表達(dá)。
　　結(jié)果：與生理鹽水對照組相比，AO組大鼠的24h蛋白尿量顯著增加(p＜0.05)并在第7周達(dá)最高峰，F(xiàn)TY720用藥組大鼠24h尿蛋白量較AO組明顯緩解(p＜0.05)。AO組大鼠外周血中淋巴細(xì)胞的數(shù)量顯著高于對照組(p＜0.05)，F(xiàn)TY720干預(yù)明顯降低大鼠外周血中淋巴細(xì)胞的數(shù)量(p＜0.05)。

4、PAS染色顯示AO組大鼠腎小管出現(xiàn)擴(kuò)張或萎縮，間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤明顯;FTY720用藥組腎小管病變明顯減輕。免疫組化顯示AO組大鼠腎間質(zhì)炎癥部位中炎癥細(xì)胞主要包括巨噬細(xì)胞、巨噬細(xì)胞分類（M1型和M2型巨噬細(xì)胞）、T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞均高于對照組，且Sphk1信號通路相關(guān)因子，包括Sphk1、S1Pr1及S1Pr3的表達(dá)也明顯升高，經(jīng)FTY720干預(yù)后，各炎癥細(xì)胞的數(shù)目及Sphk1信號通路相關(guān)因子的表達(dá)顯著降低。AO組大鼠腎組織中MCP-