肝癌靶向性T淋巴細(xì)胞活化融合基因hdsFv-CD3ζ的構(gòu)建、表達(dá)與應(yīng)用的研究.pdf

1、該研究將抗肝癌hdsFv的基因與人T細(xì)胞活化信號(hào)CD3ζ基因融合,構(gòu)建了肝癌靶向性T細(xì)胞的嵌合受體,并在人PBMC和Jurkat T淋巴瘤細(xì)胞中表達(dá),為制備肝癌靶向性T細(xì)胞奠定了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ).該研究成功的克隆了CD3ζ的胞內(nèi)區(qū)及跨膜區(qū)基因,構(gòu)建了抗肝癌hdsFv與T淋巴細(xì)胞活化信號(hào)CD3ζ嵌合受體的真核表達(dá)載體pcDNA3-hdsFv-CD3ζ,轉(zhuǎn)染入PBMC和Jurkat T淋巴瘤細(xì)胞,并以此為基礎(chǔ)進(jìn)行了T淋巴細(xì)胞活化與功能檢驗(yàn).修飾后的

2、PBMC和肝癌HepG2細(xì)胞共培養(yǎng),與未修飾的PBMC相比,能較好的誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞的凋亡.我們首次構(gòu)建了抗肝癌單鏈抗體融合CD3ζ的基因,制備了具有肝癌靶向性的PBMC和Jurkat T淋巴細(xì)胞.該實(shí)驗(yàn)結(jié)合了殺傷性T細(xì)胞的抗腫瘤作用與協(xié)同刺激分子兩大研究熱點(diǎn),使體液免疫與細(xì)胞免疫相結(jié)合,利用了TCR/CD3ζ中抗原識(shí)別和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的獨(dú)立性,將抗體分子的導(dǎo)向作用和T細(xì)胞活化信號(hào)相結(jié)合,構(gòu)建的腫瘤特異性T細(xì)胞的殺傷功能由于不受MHC限制具