肺氣虛證與肺陰虛證患者T淋巴細胞基因表達的對比研究.pdf

1、目的：通過基因芯片研究肺氣虛證和肺陰虛證患者T淋巴細胞基因表達的差異，從基因分子水平闡述肺氣虛證與肺陰虛證的物質基礎和科學內涵。 方法：采集肺氣虛證、肺陰虛證患者和正常人的外周血作為實驗血樣和對照血樣。用Ficoll技術分離外周血淋巴細胞,然后用流式細胞儀分選并純化T細胞，并采用一步法提取總RNA,逆轉錄合成cDNA探針,熒光染料標記后,采用人類全基因表達譜芯片進行芯片雜交,掃描后篩選出差異表達基因。 結果: ①肺氣虛證

2、/正常人外周血T細胞相關差異表達基因45條,其中上調41條，下調4條；②肺陰虛證/正常人差異表達基因32條,其中上調19條，下調13條；③肺氣虛證/肺陰虛證差異表達基因42條,其中上調27條,下調16條；④肺氣虛證、肺陰虛證/正常人均高表達的差異基因5條；⑤肺氣虛證組/正常人組和肺氣虛證組/肺陰虛證組均高表達的差異基因15條。 結論 1.基因芯片技術能有效地研究中醫(yī)證的基因表達譜，利用該技術研究肺系疾病相關證候本質的方法

3、是可行的。 2.肺氣虛證與肺陰虛證的T細胞相關差異表達基因改變涉及免疫、酶、核酸合成、細胞凋亡、結構蛋白、細胞周期調節(jié)、運輸、離子通道、信號傳導等多方面，主要為免疫蛋白、酶和運輸相關基因,肺氣虛證和肺陰虛證實質涉及T細胞的基因表達譜改變。 3.肺氣虛證與肺陰虛證T細胞相關差異表達基因的變化有很大不同，反映了這兩種病證類型存在本質的差異，但同時它們之間也有共同的基因表達譜改變，如PF4、IGKC、DEFA1、GNLY、 H

4、LA等基因表達有顯著差異，其中PF4基因表達下調,IGKC、DEFA1、GNLY、 HLA基因表達上調，表明兩證具有共性的免疫基因組學基礎和證候間內在的聯系, 是諸多相關基因異常表達的綜合結果。 4. 肺氣虛證組和肺陰虛證組均高表達的5條差異基因中，與血紅蛋白運輸有關的3條基因為HBB、 HBA1 、HBA2；而與運輸有關基因TXNDC5在肺氣虛證組高表達，在肺陰虛證組低表達，其異常表達均可能導致血紅蛋白運輸障礙。本課題首次從基