鹽酸羅匹尼羅經(jīng)鼻給藥的PK-PD模型研究.pdf

1、近年來，帕金森病嚴(yán)重威脅著人類的健康，羅匹尼羅作為治療帕金森病的重要藥物備受關(guān)注。但因其口服用藥后受肝首過效應(yīng)的影響，生物利用度較低。作為非侵入性遞藥方式，鼻腔給藥羅匹尼羅治療帕金森可能是一個(gè)很有效的給藥方式。因此，本文研究不同途徑給藥后羅匹尼羅在小鼠、大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)過程，評價(jià)經(jīng)鼻給藥的腦靶向性，探討可能的鼻腦直接轉(zhuǎn)運(yùn)過程，建立靜脈和鼻腔給藥后藥物吸收處置過程的藥動(dòng)學(xué)模型。另外，探討羅匹尼羅對大鼠體內(nèi)催產(chǎn)素濃度的影響，建立基于羅匹尼羅

2、抑制催產(chǎn)素釋放的藥效學(xué)模型，全面了解羅匹尼羅對機(jī)體的影響，便于臨床更安全合理的使用藥物。
　　本文首先建立了羅匹尼羅在不同生物基質(zhì)中液相質(zhì)譜聯(lián)用的定量分析方法。通過柱后推注法、預(yù)處理空白基質(zhì)后加樣法、在源多反應(yīng)監(jiān)測法直接監(jiān)測溶血甘油磷酸膽堿和甘油磷酸膽堿，系統(tǒng)評價(jià)沉淀法、固相萃取法和有機(jī)溶劑液液萃取法對樣品定量測定中存在的基質(zhì)效應(yīng)的影響，選擇最優(yōu)的樣品預(yù)處理方法。選用氘代羅匹尼羅作為內(nèi)標(biāo)，以乙酸乙酯液液萃取法預(yù)處理生物基質(zhì)樣品，采

3、用島津ODS-3色譜柱進(jìn)行色譜分離，在正離子模式下以離子對m/z261.2→114.0和m/z265.0→117.9分別監(jiān)測分析羅匹尼羅和內(nèi)標(biāo)。分析時(shí)長僅為3分鐘，保證高通量的樣品分析。方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果表明該方法專屬性高，精密度和準(zhǔn)確度良好，羅匹尼羅的血漿和腦勻漿樣品在0.01-20ng/mL濃度范圍內(nèi)線性良好，微透析樣品在0.1-200ng/mL的濃度范圍內(nèi)線性良好，基質(zhì)效應(yīng)偏差在要求范圍內(nèi)，不同條件下穩(wěn)定性偏差均在±15％范圍內(nèi)，符合

4、生物樣品定量分析方法的相關(guān)要求。方法靈敏、準(zhǔn)確、高通量，滿足相關(guān)試驗(yàn)需求。
　　為研究羅匹尼羅經(jīng)鼻給藥后的腦靶向性以及鼻腦直接轉(zhuǎn)運(yùn)通路，本文研究了不同給藥方式下羅匹尼羅在小鼠血漿和腦組織的藥代動(dòng)力學(xué)過程。通過腦組織各部位和腦切片試驗(yàn)研究鼻腦直接轉(zhuǎn)運(yùn)的可能途徑及過程。結(jié)果表明鼻腔給藥與口服給藥相比顯著提高了藥物的生物利用度，與靜脈給藥相比顯著提高藥物腦部靶向性。腦分區(qū)試驗(yàn)結(jié)果顯示藥物經(jīng)鼻腔給藥后在嗅球和腦干的暴露量較其它部位要高；腦

5、切片試驗(yàn)結(jié)果顯示藥物經(jīng)鼻腔給藥后存在從嗅球至腦中后部的一個(gè)擴(kuò)散過程，在腦干所處的切片位置也出現(xiàn)較高濃度的藥物分布，表明經(jīng)鼻遞送的藥物有部分直接通過嗅神經(jīng)和三叉神經(jīng)兩條神經(jīng)通路吸收進(jìn)入腦組織再分布到達(dá)藥效部位。以上結(jié)果提示鼻腔給藥在生物利用度和腦部靶向方面較口服用藥都有更大的優(yōu)勢，開發(fā)其經(jīng)鼻給藥制劑有意義。
　　為研究羅匹尼羅經(jīng)靜脈和鼻腔給藥后在大鼠腦內(nèi)靶點(diǎn)部位的暴露量，本課題使用腦部微透析采樣技術(shù)連續(xù)取樣測得紋狀體部位細(xì)胞外液中游

6、離藥物的濃度，通過ADAPT5軟件擬合優(yōu)化藥物經(jīng)靜脈和鼻腔途徑給藥后在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)模型，建立了給藥劑量、給藥途徑、血漿藥物濃度和腦內(nèi)游離藥物濃度的相互關(guān)系，計(jì)算相關(guān)的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。通過模型優(yōu)化建立了藥物經(jīng)鼻腔給藥后吸收進(jìn)入體內(nèi)的相關(guān)途徑及貢獻(xiàn)，結(jié)果表明部分藥物以一級(jí)動(dòng)力學(xué)過程吸收進(jìn)入體內(nèi)，部分藥物以一級(jí)和零級(jí)兩個(gè)過程直接吸收進(jìn)入腦組織。
　　為研究羅匹尼羅用藥后對大鼠體內(nèi)血漿中催產(chǎn)素濃度的影響，建立基于羅匹尼羅抑制催產(chǎn)素釋放的P

7、K/PD模型，本文采用ELASA試劑盒通過酶聯(lián)反應(yīng)法測定給藥羅匹尼羅后大鼠血漿中催產(chǎn)素的濃度。通過軟件擬合建立了藥物羅匹尼羅影響催產(chǎn)素濃度的Emax間接效應(yīng)模型，量化了腦內(nèi)游離藥物濃度和血漿中催產(chǎn)素濃度之間的關(guān)系。結(jié)合前面建立的羅匹尼羅在大鼠體內(nèi)的處置消除的藥動(dòng)學(xué)模型，建立了靜脈和鼻腔給藥后羅匹尼羅與催產(chǎn)素在大鼠體內(nèi)完整的PK/PD模型。羅匹尼羅作為抗帕金森病的重要治療藥物，研究其對體內(nèi)其它激素的影響有助于進(jìn)一步了解該藥物對機(jī)體的影響，