喹賽多對豬產氣莢膜梭菌的PK-PD同步模型研究.pdf

1、豬產氣莢膜梭菌病是由致病性產氣莢膜梭菌引起的消化道疾病，在規(guī)?；i場具有高發(fā)病率和高死亡率的特點，給養(yǎng)殖業(yè)造成嚴重損失。由于常用治療藥物的細菌耐藥性逐漸加重，產氣莢膜梭菌病的臨床治療形勢嚴峻，迫切需要開發(fā)新的治療藥物。喹賽多是新型喹噁啉類藥物，對厭氧菌產氣莢膜梭菌敏感性較高，且灌服給藥后在豬消化道內的藥物濃度遠遠高于血藥濃度，因此開發(fā)喹賽多用于治療豬產氣莢膜梭菌病具有巨大的潛力。本課題在體外和半體內條件下研究了喹賽多對豬場分離致病性產氣

2、莢膜梭菌的抗菌作用，利用超濾探針取樣技術測定喹賽多在豬消化道內的游離藥物濃度。通過建立喹賽多對產氣莢膜梭菌的半體內PK-PD模型制定出喹賽多治療豬產氣莢膜梭菌病的群體給藥方案，并利用基于細菌生長動力學機制的PK-PD模型對給藥方案進行結果預測，為指導喹賽多臨床合理應用提供理論依據。
　　1.喹賽多對產氣莢膜梭菌CPFK122995的藥效學研究
　　采用微量稀釋法測定喹賽多在肉湯培養(yǎng)基和仔豬回腸液中對產氣莢膜梭菌CPFK122

3、995的最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MBC)。通過將濃縮至1010 CFU/mL的產氣莢膜梭菌菌液涂布至含藥瓊脂平板的方法測定防突變濃度(MPC)，通過生長曲線重建的方法測定抗菌后效應(PAE)，分別在含有不同濃度喹賽多的培養(yǎng)基和仔豬回腸液中進行體外和半體內殺菌曲線試驗。
　　體外和半體內條件下喹賽多對產氣莢膜梭菌CPFK122995的MIC均為2μg/mL， MBC均為4μg/mL。喹賽多對產氣莢膜梭菌的MPC為12μ

4、g/mL，耐藥突變選擇窗(MSW)范圍為2~12μg/mL。喹賽多與產氣莢膜梭菌暴露1h產生的PAE為0.85~1.02 h，暴露2h產生的PAE為1.26~2.35 h。體外殺菌曲線試驗結果顯示喹賽多對產氣莢膜梭菌的抗菌作用為濃度依賴型，半體內殺菌曲線試驗結果與體外條件一致。
　　2.喹賽多在豬消化道內的藥動學研究
　　試驗選取12頭體重15 kg左右的健康斷奶二元雜交（長新）仔豬，隨機分為2組，每組6頭。通過外科手術的方

5、式將超濾取樣探針(UF-3-12，BASi)植入到仔豬回腸內。疾病組仔豬和健康組仔豬均按30 mg/kg劑量灌服喹賽多羧甲基纖維素混懸液，分別于給藥后0.5、1、1.5、2、2.5、3、4、5、6、8、10、12和24h利用超濾取樣探針收集200μL仔豬回腸液，用高效液相色譜方法(HPLC)測定回腸液中游離的喹賽多濃度。
　　藥動學結果表明灌服給藥后喹賽多很快進入仔豬腸道，并在腸道達到較高濃度，然后迅速被代謝和消除。疾病組仔豬腸道

6、內喹賽多消除速率明顯高于健康組仔豬。利用非房室模型擬合得到健康組和疾病組仔豬的Cmax分別為21.57和23.66μg/mL， Tmax分別為2.41和1.96 h，T1/2λ分別為3.68和5.86 h，AUC24h分別為132.78和106.40μg.h/mL，MRT分別為6.46和5.34 h，CL/F分別為222.76和267.02 mL/kg/h。
　　3.半體內PK-PD模型擬合和給藥方案制定
　　利用Sigmo

7、id Emax模型對半體內殺菌曲線試驗中AUC24h/MIC值與產氣莢膜梭菌濃度變化對數(shù)值之間的關系進行擬合，計算當E=0、-3和-4時所需要達到的PK/PD參數(shù)AUC24h/MIC折點值。結合群體MIC分布、藥動學參數(shù)CL分布和PK/PD參數(shù)折點值，利用蒙特卡羅模擬預測達標率為90％的預防、治療和根除效應的日給藥劑量。建立基于細菌生長動力學機制的PK-PD模型對給藥方案進行結果預測。
　　半體內PK/PD模型擬合得到的方程為(此

8、處公式省略)。當E分別取0、-3和-4時計算得到對應抑菌、殺菌和根除作用的AUC/MIC折點值分別為26.72、39.54和50.69 h。根據劑量計算公式，結合蒙特卡洛模擬得到達標率為90%的臨床預防、治療和根除豬產氣莢膜梭菌病的日給藥劑量為29.30、42.56和54.50 mg/kg。基于細菌生長動力學機制的PK/PD模型預測結果表明治療和根除劑量以12h或24h給藥間隔連續(xù)給藥三天均能取得預期的治療效果，而預防效應的推薦給藥方案

9、為24h給藥一次。為方便規(guī)?；i場群體給藥，日給藥劑量轉換為飼料中添加的劑量分別為580、850和1000 mg/kg。
　　本課題證實了喹賽多對產氣莢膜梭菌的濃度依賴型殺菌作用，揭示了仔豬消化道內游離狀態(tài)喹賽多的藥動學特征，利用仔豬腸液建立了喹賽多對豬產氣莢膜梭菌的半體內PK/PD模型，制定出應用喹賽多治療、預防、根除豬產氣莢膜梭菌病的科學合理給藥方案，并對給藥方案進行預測和驗證，對有效控制豬產氣莢膜梭菌病，同時拓寬新藥喹賽多的