2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩49頁未讀 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、肌肉生長抑制素(myostatin,MSTN)是肌肉生長發(fā)育的負(fù)調(diào)控因子,該基因突變使個體表現(xiàn)為“雙肌”表型。本研究利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)敲除綿羊MSTN基因,成功制備基因編輯綿羊,為未來的綿羊種質(zhì)創(chuàng)新提供了素材。
  (1)CRISPR/Cas9-MSTN-gRNA的設(shè)計及活性驗(yàn)證:從綿羊MSTN基因CDS篩選出10個靶向位點(diǎn),對其中4個靶向位點(diǎn)構(gòu)建Cas9/gRNA,并在體外環(huán)境驗(yàn)證活性后得到最高體外切割效率(55%)

2、的MSTN-gRNA-1靶向位點(diǎn)。
  (2)精子來源對卵母細(xì)胞體外受精效果的影響:附睪鮮精和凍精卵裂率分別為85.03%、7125%,附睪鮮精卵裂率顯著高于凍精(P<0.05)。附睪鮮精和凍精桑囊率分別為4874%、3176%,附睪鮮精顯著高于凍精(P<0.05)。結(jié)果表明,綿羊體外受精受精子類型影響較大,采用附睪鮮精可獲得理想卵裂率和桑囊率。
  (3)精卵共培養(yǎng)時間(18h、221h、24h、26h)對卵母細(xì)胞體外受精

3、效果的影響,精卵共培養(yǎng)18h、22h、24h、26h卵裂率分別為55.13%、83.06%、81.09%、7391%,22小時與18h差異性極顯著(P<0.01),與26h差異性顯著(P<005),與24h差異性不顯著(P>05)。精卵共培養(yǎng)18h、22h、24h、26h桑囊率分別為27.91%、4466%、35.33%、2823%,22小時與18h、24h、26h均差異性顯著(P<0.05)。結(jié)果表明,22h卵母細(xì)胞體外受精較好。

4、r>  (4)不同時間(9h、10h、11h、12h)注射外源RNA對胚胎發(fā)育的影響:9h、10h、11h、12h的卵裂率分別為42.95%、32.26%、20%、13.56%,9h與11h、12h差異性極顯著(P<001),與10h差異性顯著(P<0.05)。9h、10h、11h、12h的桑囊率分別為37.50%、14.44%、087%、12.5%,9h與10h、11h、12h均差異性極顯著(P<0.01)。結(jié)果表明,精卵共培養(yǎng)9h進(jìn)

5、行1細(xì)胞受精卵注射較好。
  (5)注射不同濃度的外源RNA對胚胎發(fā)育的影響:濃度①(Cas9:50ng/ul,gRNA.25ng/uL)、②(Cas9:25ng/uL,gRNA:12.5ng/uL)、③(Cas9.12.5ng/uL,gRNA:6.25ng/uL)的的卵裂率分別為41.67%、57.25%、59.09%,②與①差異性顯著(P<0.05),與③相比卵裂率降低,但差異性不顯著(P>005)。①、②、③的桑囊率分別為2

6、0%、3797%、38.46%,②與①差異性極顯著(P<001),與③相比,桑囊率有所下降,但差異性不顯著(P>0.05)。結(jié)果表明,為達(dá)到卵裂率及桑囊率高的效果,③濃度較好。
  (6)綿羊胚胎中g(shù)RNA-Cas9切割效率驗(yàn)證:采用注射濃度Cas9:12.5ng/uL,gRNA6.25ng/uL時,gRNA-Cas9mix(mRNAmix)對綿羊胚胎MSTN基因切割效率為23.5%。
  (7)注射后的胚胎發(fā)育到囊胚后,經(jīng)

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論