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1、目的:本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立大鼠側(cè)位液壓腦損傷模型,研究液壓腦損傷后損傷側(cè)和非損傷側(cè)大血管形態(tài)和生理功能改變及微血管損傷與腦水腫的關(guān)系,為顱腦創(chuàng)傷后損傷側(cè)和非損傷側(cè)腦血管改變的研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:
1、成年健康雄性SD大鼠45只,采用完全隨機(jī)法分為正常對(duì)照組、假手術(shù)組、實(shí)驗(yàn)組,實(shí)驗(yàn)組又分為液壓腦損傷后6h、24h及72h組,每組9只。利用改良的側(cè)位液壓損傷裝置建立大鼠顱腦損傷模型。應(yīng)用光鏡、透射電鏡觀察大鼠損傷側(cè)和非損
2、傷側(cè)大腦中動(dòng)脈主干形態(tài)學(xué)改變,應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)大鼠損傷側(cè)和非損傷側(cè)大腦中動(dòng)脈縫隙連接蛋白40(connexin40,Cx40);縫隙連接蛋白43(connexin43,Cx43)表達(dá)的改變。2、成年健康雄性SD大鼠30只,采用完全隨機(jī)法分為正常組、假手術(shù)組、實(shí)驗(yàn)組,其中實(shí)驗(yàn)組分為6h、24h、72h組,每組6只,利用液壓沖擊法建立大鼠顱腦損傷模型,顯微鏡觀察損傷側(cè)損傷區(qū)域和非損傷側(cè)相應(yīng)區(qū)域腦皮質(zhì)微血管改變情況,CD34標(biāo)記血
3、管內(nèi)皮細(xì)胞(EndothelialCell,EC),采用微血管計(jì)數(shù)法來(lái)檢測(cè)微血管密度(Microvesseldensity,MVD)改變,干濕重法檢測(cè)腦組織含水量的變化。
結(jié)果:
1、液壓腦損傷后損傷側(cè)和非損傷側(cè)大腦中動(dòng)脈均有不同程度損傷,主要表現(xiàn)為血管管腔縮小,內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)改變,內(nèi)彈力膜皺縮,平滑肌細(xì)胞水腫變形。損傷后72h電鏡下可見(jiàn)損傷側(cè)內(nèi)彈力膜斷裂,部分平滑肌細(xì)胞核固縮,異染色質(zhì)增多,非損傷側(cè)改變較輕微;與
4、假手術(shù)組相比,實(shí)驗(yàn)組大鼠損傷側(cè)和損傷側(cè)大腦中動(dòng)脈血管壁細(xì)胞Cx40、Cx43表達(dá)增加(P<0.05),24h達(dá)蛋白表達(dá)達(dá)高峰,尤以損傷側(cè)增加明顯。
2、液壓腦損傷后大鼠兩側(cè)腦皮質(zhì)微血管均有不同程度皺縮、扭曲,血管周圍間隙增寬,損傷后24h和72h組可見(jiàn)微血管內(nèi)有血栓形成;與假手術(shù)組相比腦皮質(zhì)微血管計(jì)數(shù)明顯降低(P<0.05),以損傷側(cè)為重;實(shí)驗(yàn)組損傷側(cè)和非損傷側(cè)腦皮質(zhì)含水量升高,與假手術(shù)組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);
5、腦皮質(zhì)微血管計(jì)數(shù)與腦組織含水量呈負(fù)相關(guān)(r=﹣0.76,P<0.01)。
結(jié)論:
1、液壓腦損傷后損傷側(cè)因直接受外力作用,大腦中動(dòng)脈血管結(jié)構(gòu)改變,管壁內(nèi)皮細(xì)胞出現(xiàn)凋亡表現(xiàn),非損傷側(cè)則出現(xiàn)內(nèi)皮細(xì)胞變性脫落,平滑肌細(xì)胞水腫等改變;同時(shí)損傷側(cè)和非損傷側(cè)管壁細(xì)胞Cx40和Cx43表達(dá)均增加。提示創(chuàng)傷性腦損傷后力線作用方向和非力線作用方向均存在顱內(nèi)大血管結(jié)構(gòu)和生理功能改變。
2、液壓腦損傷后損傷側(cè)和非損傷側(cè)腦皮質(zhì)微血
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