大鼠液壓腦損傷后腦血管損害的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：本課題利用大鼠液壓損傷腦外傷模型,研究大鼠腦損傷后腦血管損害形態(tài)學(xué)的改變,為腦損傷后腦缺血性損害的研究提供基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法： 1、成年健康SD雄性大鼠64只,隨機(jī)平均分為正常對(duì)照組、假手術(shù)組及外傷后3h、6h、12h、24h、48h、72h等8組,以側(cè)位液壓沖擊法建立大鼠腦損傷模型。應(yīng)用光鏡、微血管墨汁灌注、透射電鏡,觀察腦外傷后微循環(huán)形態(tài)學(xué)的改變。 2、成年健康SD雄性大鼠64只,分組及動(dòng)物模型的建立

2、如上。應(yīng)用免疫組化方法,觀察大鼠腦損傷后不同時(shí)間點(diǎn)腦微血管基底膜Ⅳ型膠原及MMP-9表達(dá)。 3、成年健康SD雄性大鼠18只,隨機(jī)平均分為假手術(shù)組、傷后3h及傷后72h等3組,以改良的大腦中動(dòng)脈定向側(cè)位液壓沖擊法建立大鼠腦損傷模型。應(yīng)用光鏡、透射電鏡,觀察大鼠腦損傷后不同時(shí)間點(diǎn)顱底大腦中動(dòng)脈形態(tài)學(xué)的變化。 結(jié)果： 1、腦損傷后微循環(huán)改變 ①大鼠腦損傷后3h、6h,傷區(qū)及周圍區(qū)微血管稀少,并有“微無血管區(qū)”。

3、傷后24h-72h發(fā)現(xiàn)微血管數(shù)目較3h、6h好轉(zhuǎn)。 ②腦損傷后HE染色顯示損傷區(qū)域腦微血管閉塞、迂曲、狹窄、斷裂、微血管腔內(nèi)紅細(xì)胞積聚,微血管周圍水腫,微血管內(nèi)可見微血栓形成。 ③傷后3h,微血管內(nèi)皮細(xì)胞輕度腫脹,基底膜輕度迂曲,管周輕度水腫。傷后6h,微絨毛形成,基底膜存在,但迂曲、破裂。傷后12h,大量微絨毛形成,基底膜腫脹,粗細(xì)不均。傷后24h,微血管內(nèi)皮細(xì)胞腫脹明顯,基底膜凸凹不平,有斷裂。傷后48h、72h,微

4、血管內(nèi)皮細(xì)胞腫脹明顯,內(nèi)皮細(xì)胞核呈均質(zhì)狀。 ④傷周神經(jīng)細(xì)胞嗜酸性變,超微結(jié)構(gòu)惡化。 2、Ⅳ型抗原和MMP-9免疫組化檢測(cè)：腦微血管外細(xì)胞間質(zhì)水腫,基底膜節(jié)段性溶解、缺損,有紅細(xì)胞漏出。外傷24h后,腦微血管基底膜IV型抗原明顯減少,與正常對(duì)照組比較,具顯著性差異。隨時(shí)間延長(zhǎng),微血管基底膜損害加重,IV型膠原抗原逐漸減少,至72h明顯減少,與正常對(duì)照組比較,具顯著性差異。與此同時(shí),外傷后挫傷周圍腦組織的MMP-9表達(dá)逐漸增

5、強(qiáng)。傷后3h可以觀察到明顯的MMP-9表達(dá),傷后72h仍維持MMP-9高表達(dá)。 3、腦損傷后大腦中動(dòng)脈改變：外傷后3h光鏡下血管直徑變小,管壁增厚,并有少量小空泡形成。電鏡下血管內(nèi)皮細(xì)胞輕度腫脹,彈力膜開始輕微卷曲,平滑肌細(xì)胞內(nèi)可見線粒體腫脹。外傷后72h光鏡下血管直徑明顯變小,管壁明顯增厚,并有較多小空泡形成,內(nèi)彈力纖維皺縮,向血管腔內(nèi)隆起,可見內(nèi)膜處有疣狀贅生物突入管腔內(nèi)。電鏡下血管內(nèi)皮細(xì)胞腫脹、脫落,形狀不規(guī)則,胞核變形,

6、有核固縮現(xiàn)象,內(nèi)皮細(xì)胞間緊密聯(lián)結(jié)消失。內(nèi)彈力纖維層明顯皺褶,少數(shù)可見內(nèi)彈力膜斷裂現(xiàn)象。平滑肌細(xì)胞排列較紊亂,胞漿內(nèi)空泡形成,部分平滑肌細(xì)胞存在纖維化改變。 結(jié)論： 1、液壓腦損傷后大鼠損傷區(qū)及傷周微血管稀疏。腦損傷后微血管管腔狹窄,管腔內(nèi)有微絨毛形成,部分微血管內(nèi)可見微血栓。隨時(shí)間的延長(zhǎng),腦微血管結(jié)構(gòu)雖有部分改善,但腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞及周圍的神經(jīng)細(xì)胞卻呈進(jìn)行性損害。提示腦損傷后局部腦微循環(huán)障礙是引起腦缺血性損害的重要病理基