脂肪酸營養(yǎng)對中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)免疫及耐低氧能力的影響.pdf

1、中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）又稱毛蟹，河蟹，屬甲殼綱，十足目，方蟹科，絨螯蟹屬，為我國特產(chǎn)。主要分布于中國東部海域沿岸及通海的河流、湖泊中，現(xiàn)為我國主要養(yǎng)殖的經(jīng)濟蟹類。近幾年河蟹的養(yǎng)殖面積不斷地增加，其養(yǎng)殖產(chǎn)量2005年高達57萬噸。池塘養(yǎng)殖是我國河蟹養(yǎng)殖最主要的養(yǎng)殖形式，在池塘養(yǎng)殖過程中，特別是高溫季節(jié)，大量的殘剩飼料以及生物的排泄物等有機廢物無法被及時分解而不斷沉積，加之許多養(yǎng)殖池塘由于多年的養(yǎng)殖疏于清淤，造成

2、池塘沉積過多的淤泥，這大大增加了池塘底部有機耗氧，使池塘底質(zhì)惡化，致使主要底棲習性的河蟹長期處于低氧的環(huán)境脅迫下(hypoxiastress)。中華絨螯蟹在低氧脅迫下，一方面可能造成其免疫機能的下降，抗病力降低，繼而感染疾病而招致死亡。另一方面免疫能力的下降又會降低其抗低氧能力，兩者相互作用的疊加，是最終造成高溫季節(jié)河蟹大量死亡的重要因素之一。
　　改善中華絨螯蟹的營養(yǎng)，研究營養(yǎng)與其抗環(huán)境脅迫能力的關(guān)系，是提高其免疫性能和抗低氧能

3、力的一個主要途徑。必需脂肪酸(EFA)如:花生四烯酸(ARA)、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)等在水產(chǎn)動物體內(nèi)的生理和生化合成中起著各種各樣的功能。ARA，EPA和DHA等脂肪酸是細胞膜的重要組成部分，能夠影響細胞吞噬能力及呼吸爆發(fā)強度，還可以通過控制與免疫相關(guān)的酶活性而增強水生動物機體的免疫能力。同時ARA和EPA是類二十烷酸的前體，類二十烷酸是一族在各種應激反應中具有高度活性的分子，對水產(chǎn)動物的免疫及抗脅迫能力有重

4、要的作用。但是，關(guān)于脂肪酸營養(yǎng)對中華絨螯蟹幼蟹免疫和耐低氧脅迫的研究從未有過報道，在這個方面還是空白。本論文的目的，首先研究低氧對中華絨螯蟹幼蟹免疫及生理的影響;然后改變飼料中高不飽和脂肪酸（ARA，DHA，DHA/EPA）的含量，測定脂肪酸營養(yǎng)對幼蟹免疫和耐低氧能力的影響;最后，對中華絨螯蟹成蟹投喂含三種不同魚油、豆油的飼料，測定不同油脂對成蟹免疫及耐低氧能力的影響。取得成果具體如下:
　　1、低氧對中華絨螯蟹（Eriochei

5、r sinensis）幼蟹免疫及生理的影響
　　中華絨螯蟹幼蟹(1.4±0.43g)放入溶解氧為2.04±0.16（低氧，處理組）和8.01±0.22 mg/L（正常溶氧，對照組）的水體中24h，測量了其在0和24h后的總血細胞密度(THC)，透明血細胞密度。在試驗和對照組中，對0，2，8和24h時血淋巴中超氧化物歧化酶活性(SOD)，乳酸，血藍蛋白的濃度以及肝胰腺的代謝（葡萄糖，總膽固醇，尿酸，總蛋白，尿素和甘油三酯的濃度）進行

6、了測定分析?？傃毎屯该餮毎芏仁艿脱跤绊戯@著，在低氧24h后比起始濃度分別降低了66％和49％。SOD酶活性在低氧8h后比起始時顯著升高，乳酸濃度在低氧2，8和24h后都顯著升高。血藍蛋白濃度呈現(xiàn)一個先降低后上升的趨勢，24h時與初始差異不大。試驗組中，肝胰腺的葡萄糖，膽固醇和尿酸含量在24h內(nèi)發(fā)生了顯著變化?？偟鞍?，尿素和甘油三酯的濃度在對照和試驗組中0，2，8，24h之間均沒有顯著差異。由此可見，低氧對中華絨螯蟹幼蟹的影響是全

7、面的。
　　2、投喂不同DHA或ARA含量的飼料對中華絨螯蟹幼蟹（Eriocheirsinensis）免疫和耐低氧能力的影響
　　用含不同濃度的必需脂肪酸(EFA)——DHA(C22:6n-3)或ARA(C20:4n-6)飼料分別投喂中華絨螯蟹幼蟹3個半月和4個月，然后測定了其低氧24h（DHA和ARA試驗）和正常溶氧下（ARA試驗）的免疫和生理性能。五種不同DHA和ARA飼料(D1，D2，D3，D4，D5和A1，A2，A3

8、，A4，A5)中DHA和ARA的添加比例為0％，0.25％，0.5％，1％，1.5％和0％，0.3％，0.6％，0.9％，1.2％（占飼料干重比例）。在DHA飼料試驗中幼蟹低氧24h后血淋巴中THC（總血細胞密度）和透明血細胞密度在五個飼料組之間沒有顯著性差異。在五個飼料組間，Hc（血藍蛋白）的變化呈現(xiàn)先降低后上升再下降的趨勢，飼料中DHA的添加對Hc的濃度有顯著影響。低氧24h后在添加DHA的飼料組SOD酶的活性顯著高于0％DHA添加

9、組。在肝胰腺中，隨著飼料中添加DHA含量的增加總膽固醇和甘油三酯含量逐漸上升。在ARA試驗中，低氧脅迫對幼蟹的生理和免疫指標的影響明顯。在正常溶氧下，飼料中ARA的添加使幼蟹血淋巴中THC和透明血細胞密度顯著上升，特別是適量添加時更明顯(0.6，0.9％)。然而，在正常和低氧下血淋巴中SOD活性和Hc的含量不受飼料中添加ARA量的影響，各個飼料組之間沒有顯著差異。在兩個溶氧下飼料中適當?shù)奶砑覣RA(0.6，0.9％)對血淋巴中乳酸和尿酸

10、的濃度影響顯著。低氧脅迫后肝胰腺中的免疫和生理性能在各ARA飼料組間沒有顯著差異?？傊?，低氧對幼蟹的免疫生理代謝有明顯的負面影響。飼料中DHA的添加對中華絨螯蟹幼蟹的營養(yǎng)和生理性能及抗低氧的能力有改善作用。ARA試驗結(jié)果表明飼料中添加適量水平的ARA(0.6，0.9％)能顯著改善中華絨螯蟹幼蟹免疫和生理代謝功能及抗低氧的能力。
　　3、投喂不同DHA/EPA比例飼料對雌雄中華絨螯蟹幼蟹（Eriocheirsinensis）免疫和耐

11、低氧能力的影響
　　中華絨螯蟹幼蟹(1.32-1.76g)投喂不同DHA/EPA(DHA，C22:6n-3; EPA，C20:5n-3)比例的飼料3個月，然后將其放入溶解氧為2.34±0.30mg/L和8.02±0.35mg/L的水體中24h，測定其生理和免疫指標的變化。含不同DHA/EPA比例的飼料分為5組(簡稱:DE1，DE2，DE3，DE4，DE5)，其中DHA/EPA的比例分別為:0.3，0.6，1，2和3。測定結(jié)果發(fā)現(xiàn)，

12、飼料中血液的免疫指標受飼料中DHA/EPA比例變化的影響不大，但是低氧后血藍蛋白含量及正常溶氧下γ-GGT酶活性受飼料中DHA/EPA比例的影響顯著?？寡趸窼OD在正常溶氧下隨DHA/EPA的增加呈現(xiàn)降低的趨勢，但是低氧后各組之間的SOD活性沒有顯著差異。血淋巴中生理代謝指標受DHA/EPA比例變化影響顯著，特別是乳酸脫氫酶的活性。另外，低氧對河蟹幼蟹的生理免疫影響顯著。在肝胰腺中，受低氧脅迫后，γ-GGT酶活性和葡萄糖含量在DHA/

13、EPA比例為2時顯著高于其他組，而乳酸的含量在DHA/EPA比例為1的組最高。幼蟹性別對河蟹免疫和生理代謝指標基本沒有影響?？偠灾?，飼料中DHA/EPA比例為1和2時對中華絨螯蟹幼蟹的免疫和生理更有益，對其抗低氧脅迫也更有幫助。
　　4、投喂添加三種不同油脂(魚油、豆油、魚油豆油混合(1∶1))飼料對中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）免疫及耐低氧能力的影響
　　為了研究飼料中添加魚油，豆油對中華絨螯蟹成蟹體

14、重，免疫，代謝和耐低氧的影響，配制了添加不同魚油和豆油比例的三種蟹用飼料，分別投喂中華絨螯蟹成蟹115d，然后測量了它們體重的變化，再將其放入溶解氧為2.57±0.44和9.06±0.06mg/L的水體中90h，測量其免疫和代謝指標的變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn):投喂含三種不同油脂飼料的中華絨螯蟹各組之間體重沒有顯著性差異;低氧脅迫對河蟹代謝指標影響較大;添加魚豆混合油組飼料對中華絨螯蟹免疫和抗氧化能力有促進作用，相較于其他兩組，此組河蟹耐低氧的能力