中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）促雄性腺素分離與純化的初步研究.pdf

1、促雄性腺(androgenic gland)是雄性甲殼動(dòng)物特有的一種內(nèi)分泌腺。1947年，Cronin首先在藍(lán)蟹(CaUinectes sapidus)中觀察到了一種腺體結(jié)構(gòu)，到1954年Charniaux-Cotton和Fage在端足目的跳溝蝦(Orchestia gammarella)中發(fā)現(xiàn)該腺體與性別分化有關(guān)。隨后，各國(guó)學(xué)者在其他種類(lèi)中也紛紛發(fā)現(xiàn)了促雄性腺，相繼證明該腺體幾乎存在于軟甲亞綱的各個(gè)目中。 對(duì)于我國(guó)特有的經(jīng)濟(jì)品

2、種中華絨螯蟹，自上個(gè)世紀(jì)90年代以來(lái)，其養(yǎng)殖在我國(guó)得到了空前的發(fā)展，為養(yǎng)殖者帶來(lái)了巨大的經(jīng)濟(jì)效益。然而，與大規(guī)模的養(yǎng)殖相比，對(duì)于中華絨螯蟹繁殖生物學(xué)理論基礎(chǔ)的研究，則顯得較為匱乏。促雄性腺素作為中華絨螯蟹性別調(diào)控的重要激素，迄今為止國(guó)內(nèi)外尚未有其分離純化方面的相關(guān)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)期望通過(guò)對(duì)中華絨螯蟹促雄性腺素分離純化的初步研究，得到純化的促雄性腺素，并試圖尋找一種方便、快捷、高效的生物活性檢測(cè)方法來(lái)加快對(duì)十足目中促雄性腺素的研究。

3、本實(shí)驗(yàn)中中華絨螯蟹促雄性腺蛋白提取物經(jīng)過(guò)凝膠層析過(guò)濾，所得到的各個(gè)分離組分分別進(jìn)行促雄性腺素生物活性的初步檢測(cè)，以JHIII作為陽(yáng)性對(duì)照，輸精管和精巢的蛋白提取物作為陰性對(duì)照，結(jié)果發(fā)現(xiàn)樣品1-18，1-22，1-25，1-28，2-19，2-24，2-25與PBS對(duì)照組相比對(duì)卵巢組織氨基酸的吸收具有明顯的抑制作用，且差異顯著，具有生物活性的潛在可能；輸精管和精巢對(duì)照組與PBS無(wú)顯著差異，JHIII陽(yáng)性對(duì)照與PBS差異極為顯著，上述七個(gè)樣

4、品中存在潛在的促雄性腺素。再將具有初步活性的樣品通過(guò)幼體注射的方式進(jìn)行生物活性最終檢測(cè)，其中樣品2-24處理組中出現(xiàn)了雄性化現(xiàn)象；說(shuō)明該樣品中存在潛在的中華絨螯蟹促雄性腺素;對(duì)該樣品的進(jìn)一步分析正在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。該處理組其幼蟹的成活率為25.71％，雄性化的發(fā)生率為11.1％。本論文還首次對(duì)中華絨螯蟹雌體第一次排卵后的卵巢結(jié)構(gòu)變化進(jìn)行連續(xù)的組織學(xué)觀察，并且發(fā)現(xiàn)第一次排卵后10-15天內(nèi)的中華絨螯蟹親蟹的卵巢最適宜用做中華絨螯蟹促雄性腺素